Постановление Главного государственного санитарного врача Республики Беларусь от 26.12.2005 № 258 "Об утверждении Инструкции 4.1.10-15-92-2005 "Санитарно-химические исследования резин и изделий из них, предназначенных для контакта с пищевыми продуктами"

Текст документа с изменениями и дополнениями по состоянию на ноябрь 2013 года

< Главная страница

Стр. 2

Страницы: | Стр. 1 | Стр. 2 | Стр. 3 | Стр. 4 |

Хлороформные экстракты сливают в фарфоровую чашку или в колбу и удаляют растворитель до объема 0,1 - 0,3 мл (из колбы растворитель отгоняют с холодильником Либиха на водяной бане с температурой 85 °C или на ротационном испарителе; из чашки испарением на воздухе при комнатной температуре в вытяжном шкафу). Хроматографирование на пластинках (силикагель + гипс) или типа "Силуфол" осуществляется согласно разделу 5, используя при этом ПФ (смесь ацетона и аммиака 99:1,0) и проявляющие (окрашивающие) реагенты. Идентификация и количественное определение - по разделу 5 настоящей Инструкции.

Дифенилгуанидин на пластинках при использовании гипохлорита натрия обнаруживается в виде пятен коричневого цвета. Rf - дифенилгуанидина - 0,36 +/- 0,03. Предел обнаружения - 0,05 мг/л.

5.2. Определение стабилизаторов (антиоксидантов) - ионол (агидол-1), противостаритель П-23 (алкофен ББ), неозон Д (нафтам 2)

1. Общие сведения

Настоящая Инструкция предназначена для научно-исследовательских организаций, производственных лабораторий, органов и учреждений, осуществляющих государственный санитарный надзор, и других заинтересованных организаций.

Настоящая Инструкция разработана с целью обеспечения контроля допустимых количеств миграции вредных веществ из резин в вытяжки.

Стабилизаторы применяют для их изготовления, от различных видов старения и деструкции. В качестве стабилизаторов используют соединения фенольного типа (ионол, алкофен ББ) и аминного типа (неозон Д). Стабилизаторы и возможные продукты их превращения могут мигрировать из резин в контактируемые среды, что обуславливает необходимость их определения в вытяжках при гигиенической оценке "пищевых" марок резин.

Характеристика наиболее широко применяемых стабилизаторов:

Агидол-1 (ионол, ВНТ-бутилокситолуол, алкофен БП)

     С15Н24О                                    Молекулярная масса - 220,36

Агидол-1, ионол, ВНТ-бутилокситолуол, алкофен БП - кристаллический порошок белого цвета. Температура плавления - 70 °C, температура кипения - 265 °C. Растворим в большинстве органических растворителей. Нерастворим в воде и щелочах.

     Противостаритель П-23 (алкофен ББ)         Молекулярная масса - 262,43

Противостаритель П-23 (алкофен ББ) (2,4,6-тритретбутилфенол) - кристаллический порошок со светло-зеленым оттенком. Температура плавления - 135 °C. Растворим в большинстве органических растворителей. Не растворяется практически в воде, водных растворах щелочей и кислот.

Нафтам-2 (неозон Д)

     C16H13N                                    Молекулярная масса - 219,20

Нафтам-2, неозон Д (N-фенил-бетта-нафтиламин) - кристаллический порошок от белого до бежевого цвета. Температура плавления - 108 °C. Растворим в большинстве органических растворителей. Нерастворим в воде.

2. Принцип метода

Методика, представленная в настоящей Инструкции, основана на предварительном выделении стабилизаторов (антиоксидантов) из вытяжек путем экстрагирования органическими растворителями, концентрирования и хроматографирования в тонком слое.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства и реактивы

При выполнении измерений должны применяться следующие средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы:

     Весы аналитические типа ВЛА-200                ГОСТ 24104-2001
     Колбы круглодонные                             ГОСТ 25336-82
     Фарфоровые чашки                               ГОСТ 9147-80Е
     Сита лабораторные                              ТУ 3618-001-39436682-98
     Ступки фарфоровые                              ГОСТ 9147-80
     Набор гирь Г-2-210                             ГОСТ 7328-2001
     Водоструйный насос                             ГОСТ 25336-82
     Эксикатор без крана                            ГОСТ 25336-82
     Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2,
     пределы - 0 - 100 °C, цена деления - 1 °C      ТУ 25-2021-003-88
     Холодильник Либиха                             ГОСТ 25336-82
     Баня водяная                                   ГОСТ 9147-80
     Колбы мерные на 100 мл                         ГОСТ 1770-74
     Колбы плоскодонные конические                  ГОСТ 25336-82
     Воронки делительные ВД2-250                    ГОСТ 25336-82
     Цилиндры мерные вместимостью 10 - 250          ГОСТ 1770-74
     Микрошприцы МШ-10
     Аппарат для встряхивания проб типа АВУ-6С
     Ротационный испаритель IKA RV05 basic (Германия)
     Стеклянные  сосуды  с  притертой  пробкой  или  с плотно закрывающейся
стеклянной пластинкой (емкости для приготовления вытяжек из резин)
     Стеклянные камеры для ТСХ с притертыми крышками
     Распылитель стеклянный с грушей
     Пластины  для  ТСХ  "Silufol"  (Чехия) или "Сорбфил" (Россия) размером
15 x 15 или 20 x 20 см
     Бумага индикаторная универсальная для контроля рН, ТУ 6-09-1181-76
     Фильтры обеззоленные                           ТУ 6-09-1678-86

Необходимые реактивы и растворы

1. Хлороформ по ГОСТ 20015-88.

2. Углерод четыреххлористый по ГОСТ 20288-74.

3. Спирт этиловый по ГОСТ 18300-72.

4. Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

5. Кислота соляная по ГОСТ 3118-77.

6. Эфир диэтиловый (серный) по ГОСТ 22300-76.

7. Натр едкий по ГОСТ 4328-77.

8. Кислота фосфорно-молибденовая по ТУ 6-09-3540-79.

9. 2,6-дихлорхинон-4-хлоримид по ТУ 6-09-05-889-78.

10. Толуол по ГОСТ 5789-78.

11. Гептан нормальный по ГОСТ 25828-83.

12. Метилен хлористый по ГОСТ 9968-86.

13. п-Нитроанилин, ТУ 6-09-258-77.

14. Натрий азотистокислый по ГОСТ 4197-74.

15. Системы подвижных фаз:

15.1. Четыреххлористый углерод.

15.2. Смесь четыреххлористого углерода и эфира диэтилового в соотношении 9:1.

15.3. Смесь гептана и толуола в соотношении 1:1.

16. Проявляющие (окрашивающие реагенты):

16.1. Кислота фосфорно-молибденовая - 10% раствор спиртовой.

16.2. 2,6-дихлорхинон-4-хлоримид - 1% спиртовой раствор.

16.3. Диазотированный п-нитроанилин (способ приготовления см. п. 5.2.2).

17. Аммиачная камера: в эксикатор с притертой крышкой и фарфоровой вставкой наливают водный раствор аммиака так, чтобы раствор находился ниже уровня фарфоровой вставки не менее чем на 2 см.

18. Стандартный раствор агидола-1 в хлороформе с концентрацией 100 мкг/мл.

19. Стандартный раствор П-23 в хлороформе с концентрацией 100 мкг/мл.

20. Стандартный раствор нафтама-2 в хлороформе с концентрацией 100 мкг/мл.

21. Силикагель КСК, ГОСТ 3956-76.

22. Гипс медицинский.

Могут быть использованы другие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы, по техническим и метрологическим характеристикам не уступающие указанным в настоящей Инструкции.

4. Требования безопасности

Проведение измерений должно выполняться согласно требованиям правил безопасной работы в химических лабораториях и инструкций по эксплуатации приборов.

5. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений могут быть допущены лица, имеющие высшее или среднее специальное образование, медицинское или техническое, изучившие правила безопасной работы в химических лабораториях и настоящую Инструкцию.

6. Условия выполнения измерений

При выполнении измерений в лаборатории согласно ГОСТ 15150-69 "Машины, приборы и другие технические изделия. Исполнения для разных климатических районов. Категории, условия эксплуатации, хранения и транспортирования в части воздействия климатических факторов внешней среды" должны быть соблюдены следующие условия:

температура воздуха - 20 +/- 5 °C;

атмосферное давление - 84,0 - 106,7 кПа (630 - 800 мм рт.ст.);

влажность воздуха - не более 80% при температуре 25 °C.

7. Ход определения

Подготовку камер, пластинок и др. выполнять по п. 5 "Общие приемы работы методом тонкослойной хроматографии (ТСХ)".

При исследовании модельных растворов кислого характера вытяжки подщелачивают несколькими каплями 40% раствора едкого натра до pH = 8 по универсальной индикаторной бумаге.

Для определения антиоксидантов фенольного типа (ионола, алкофена ББ) 200 мл вытяжки экстрагируют 2 раза по 5 минут, используя 50 мл хлороформа. Объединенный экстракт концентрируют путем отгонки растворителя с холодильником Либиха на водяной бане с температурой 85 °C или на ротационном испарителе; из чашки - испарением на воздухе при комнатной температуре в вытяжном шкафу.

Хроматографирование проводят согласно разделу 5, используя ПФ и проявляющие (окрашивающие) реагенты, представленные в перечне и табл. 3 (приложение 8).

Для определения антиоксиданта аминного типа (нафтама-2) 100 мл водной вытяжки экстрагируют трижды свежими порциями хлороформа или хлористого метилена, используя 20 мл на каждую экстракцию.

Объединенные экстракты сушат над сернокислым натрием и упаривают до объема 0,1 - 0,3 мл (но не досуха) на водяной бане, температура которой не превышает 80 °C, или на ротационном испарителе. Хроматографирование проводят согласно разделу 5, используя ПФ и проявляющие (окрашивающие) реагенты, представленные в перечне и табл. 3 (приложение 8).

Идентификацию и количественное определение проводят по разделу 5.

5.3. Определение пластификаторов эфиров фталиевой кислоты

5.3.1 Определение ДБФ и ДОФ (дибутил- и диоктилфталатов) методом ТСХ

1. Общие сведения

Дибутиловый эфир фталиевой кислоты

     C16H22O4                                Молекулярная масса - 278,34

ДБФ (дибутилфталат) - бесцветная маслянистая жидкость без запаха. Температура кипения - 340 °C, температура плавления - 35 °C. Плотность при 25 °C - 1,047 - 1,050 г/куб.см. Хорошо растворим в органических растворителях (этаноле, хлороформе, ацетоне), воде - 0,1%.

Малотоксичен, вызывает раздражение слизистых оболочек. Относится к 3-му классу опасности.

Допустимые количества миграции (ДКМ) дибутилфталата в модельные среды и пищевые продукты не допускаются.

Диоктиловый эфир фталиевой кислоты

     C24H38O4                                Молекулярная масса - 390,64

ДОФ (диоктилфталат) - бесцветная маслянистая жидкость со слабым запахом. Температура кипения - 229 °C при 4,5 мм рт.ст., температура плавления - 40 °C. Плотность при 20 °C - 0,9780 г/куб.см. Растворим в петролейном эфире, бензине, этаноле, хлороформе, ацетоне, четыреххлористом углероде, бензоле, толуоле. Нерастворим в воде.

Относится к 3-му классу опасности.

ДКМ диоктилфталата в модельные среды и пищевые продукты - 2,0 мг/куб.дм.

Оба вещества широко применяются в качестве пластификаторов при изготовлении полимеров.

2. Принцип метода

Методика, представленная в настоящей Инструкции, основана на предварительном выделении пластификаторов из вытяжек путем экстрагирования органическими растворителями, концентрирования и хроматографирования методом ТСХ.

Допускается проведение исследования вытяжек по методике выполнения измерений концентраций дибутилфталата (ДБФ) и диоктилфталата (ДОФ) в водной и водно-спиртовых средах, имитирующих алкогольные напитки методом газовой хроматографии МВИ. МН 1402-2000, и другим методикам, утвержденным в установленном порядке.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства и реактивы

     Весы аналитические типа ВЛА-200                        ГОСТ 24104-2001
     Набор гирь Г-2-210                                     ГОСТ 7328-2001
     Шкаф  сушильный  электрический, обеспечивающий
     поддержание заданного температурного режима
     от 40 до 200 °C                                        ТУ 64-1.1411-76
     Баня водяная                                           ГОСТ 9147-80
     Колбы мерные на 100 мл                                 ГОСТ 1770-74
     Колбы плоскодонные конические                          ГОСТ 25336-82
     Воронки делительные ВД2-250                            ГОСТ 25336-82
     Цилиндры мерные вместимостью 10 - 250 мл               ГОСТ 1770-74
     Фарфоровая чашка                                       ГОСТ 9147-80Е
     Колбы круглодонные                                     ГОСТ 25336-82
     Ротационный испаритель IKA RV05 basic (Германия)
     Водоструйный насос                                     ГОСТ 25336-82
     Микрошприцы МШ-10
     Прибор для флуоресцентного анализа витаминов в растворе (модель 833)
     Стеклянные сосуды с притертой пробкой или с плотно закрывающейся
     стеклянной пластинкой (емкости для приготовления вытяжек из резин)
     Стеклянные камеры для ТСХ с притертыми крышками
     Распылитель стеклянный с грушей
     Пластины   для  ТСХ  "Silufol"  УФ254  (Чехия)  размером  15 x 15  или
20 x 20 см
     Устройство для сушки пластин тонкослойной хроматографии УСП-1
     Фильтры обеззоленные                                   ТУ 6-09-1678-86

Необходимые реактивы и растворы

1. Н-гептан по ГОСТ 25828-83.

2. Натрий сернокислый, безводный, ч.д.а. по ГОСТ 4166-76.

3. Эфир диэтиловый (серный) по ТУ 2600-001-43852015-02.

4. Кислота серная, ч.д.а. по ГОСТ 4204-77.

5. п-Диметиламинобензальдегид по ТУ 6-09-3272-77.

6. Бензол, ч.д.а. по ГОСТ 5955-75.

7. Этилацетат, ч.д.а. по ГОСТ 22300-76.

8. Дибутилфталат, х.ч. по ГОСТ 8728-88.

9. Диоктилфталат, х.ч. по ГОСТ 8728-88.

10. Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

11. Подвижные фазы:

11.1. Бензол.

11.2. Смесь бензола, этилацетата в соотношении 95:5.

12. Проявляющий реагент - свежеприготовленный раствор п-диметиламинобензальдегида в смеси эфира и серной кислоты 1:1.

13. Способ приготовления: 0,25 г п-диметиламинобензальдегида растворяют в 50 мл смеси концентрированной серной кислоты и диэтилового эфира (1:1).

14. Стандартные растворы ДБФ и ДОФ в гептане с концентрацией 100 мкг/мл.

4. Требования безопасности

5. Требования к квалификации оператора

6. Условия выполнения измерений

температура воздуха - 20 +/- 5 °C;

атмосферное давление - 84,0 - 106,7 кПат (630 - 800 мм рт.ст.);

влажность воздуха - не более 80% при температуре 25 °C.

7. Ход определения

20 мл вытяжки трижды экстрагируют Н-гептаном порциями по 10 мл. Гептановый экстракт сушат сернокислым натрием "б/в" и концентрируют до 0,2 - 0,3 мл, удаляя растворитель на водяной бане или на ротационном испарителе. Хроматографируют по разделу 5. Используются подвижные фазы бензола или смесь бензола и этилацетата (95:5). Для обнаружения фталатов пластину перед опрыскиванием проявляющим реагентом выдерживают в сушильном шкафу при температуре 150 - 160 °C в течение 5 - 10 мин, затем обрабатывают раствором п-диметиламинобензальдегида и вновь выдерживают в течение 20 мин при той же температуре.

При наличии фталатов проявляются пятна красно-бурого цвета Rf = 0,40 +/- 0,02 для ДБФ и 0,57 +/- 0,02 для ДОФ в системе бензол/этилацетат.

Идентификация и количественное определение - по разделу 5 настоящей Инструкции.

Используя пластины "Силуфол" с люминесцентным индикатором (для УФ = 254 мм), хроматографирование проводят в тех же условиях и определяют фталаты, облучая пластину УФ-светом.

Фталаты обнаруживаются в виде цветных пятен на флюоресцирующем фоне.

Предел обнаружения - 0,1 мг/куб.дм.

5.3.2. Газохроматографический метод определения диоктилфталата и дибутилфталата в модельные среды и пищевые продукты

1. Общие сведения

ДОФ (диоктиловый эфир фталевой кислоты) - C24H38O4, М.м. 390,64 - бесцветная маслянистая жидкость со слабым запахом. Температура кипения - 229 °C, температура плавления - минус 40 °C. Плотность при 20 °C - 0,9780 г/куб.см. Растворим в петролейном эфире, бензине, хлороформе, четыреххлористом углероде, бензоле, толуоле. Нерастворим в воде.

Допустимое количество миграции ДОФ в модельные среды и пищевые продукты - 2 мг/куб.дм.

Предел обнаружения в вытяжках - 0,02 мг/куб.дм; в пищевых продуктах - от 0,03 до 0,08 мг/куб.дм.

ДБФ (дибутиловый эфир фталевой кислоты) - C16H22O4, М.м. 278,4 - бесцветная маслянистая жидкость без запаха. Температура кипения - 340 °C, температура плавления - минус 35 °C, плотность при 25 °C - 1,047 - 1,050 г/куб.см.

Хорошо растворим в органических растворителях, в воде - 0,1%.

Допустимое количество миграции ДБФ в модельные среды и пищевые продукты - не допускается.

Предел обнаружения в вытяжках - 0,002 мг/куб.дм; в пищевых продуктах - от 0,003 до 0,008 мг/куб.дм.

Относительная ошибка определения не превышает 15%.

2. Принцип метода

Метод основан на переэкстракции вещества из модельных сред толуолом, с последующим хроматографическим разделением на колонке с применением детектора по электронному захвату.

3. Средства измерения, вспомогательные устройства и реактивы

Средства измерений

     Хроматограф газовый с детектором по электронному захвату
     Весы лабораторные ВЛР-200 аналитические            ГОСТ 24104-80Е
     Меры массы Г-2-210                                 ГОСТ 7328-82Е
     Микрошприцы МШ-10                                  ТУ 2-833-106
     Колбы мерные 2-50-2, 2-100-2                       ГОСТ 25336-82
     Пипетки 1-1-2-1, 1-1-2-10                          ГОСТ 29227-91
     Делительные воронки вместимостью 100 мл
     Фарфоровый тигель вместимостью 25 мл

Вспомогательные устройства

Колонка хроматографическая 100 x 0,3 см.

Материалы

Аргон (ГОСТ 10157-79) высшего сорта или азот (ГОСТ 9293-74) газообразные.

Реактивы

Диоктилфталат по ГОСТ 8728-77.

Дибутилфталат по ГОСТ 8728-77.

Спирт этиловый ректификованный технический (ГОСТ 18300-87), 90%, перегнанный.

Хроматон N-AW-DMCS (зернением 0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30.

Толуол по ГОСТ 25828-83.

4. Требования безопасности

5. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений могут быть допущены лица, имеющие высшее или среднее специальное образование, медицинское или техническое, прошедшие специализацию по работе на газовом хроматографе, изучившие правила безопасной работы в химических лабораториях и настоящую Инструкцию.

6. Условия выполнения измерений

температура воздуха - 20 +/- 5 °C;

атмосферное давление - 84,0 - 106,7 кПа (630 - 800 мм рт.ст.);

влажность воздуха - не более 80% при температуре 25 °C.

7. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: подготовку хроматографической колонки, приготовление стандартных градуировочных смесей, установление градуировочных характеристик, подготовку проб.

Подготовка хроматографической колонки

Приготовленной насадкой заполняют чистую и сухую колонку хроматографа, закрывают ее концы тампоном из стекловолокна и присоединяют к газовой линии хроматографа. Для стабилизации продувают ее инертным газом, не соединяя колонку с детектором, с расходом 20 - 30 куб.см/мин в режиме программирования температуры от 50 до 250 °C, а затем в изотермическом режиме при 250 °C в течение 12 часов. После чего колонку охлаждают, подсоединяют к детектору, хроматограф выводят на рабочий режим.

Условия хроматографирования

температура колонки - 220 °C;

испарителя - 260 °C;

детектора - 260 °C;

расход газа-носителя (аргона или азота) - 30 куб.см/мин;

время удерживания ДБФ - 2 мин 30 сек;

время удерживания ДОФ - 6 мин 40 сек.

Допускается корректировка условий хроматографирования при использовании различных видов хроматографов и колонок с условием полного разделения компонентов смеси на хроматограмме.

8. Приготовление стандартных градуировочных смесей

Перед проведением анализа всю лабораторную посуду необходимо тщательно вымыть с соблюдением требований, предъявляемых к микроанализу: обработать хромовой смесью не менее чем на 2 ч, многократно промыть водопроводной и 4 - 5-кратно дистиллированной водой. Высушить посуду.

Микрошприц промывают многократным (20 - 25 раз) прокачиванием растворителя, с которым предстоит работать (толуолом, спиртом и т.п.).

8.1. Основные стандартные растворы N 1 для ДБФ и N 3 для ДОФ с концентрацией приблизительно 1000 мкг/куб.см в спирте.

Мерную колбу вместимостью 50 куб.см с 10 - 15 куб.см этилового спирта взвешивают на аналитических весах с точностью до 0,00015 г. Используя пипетку на 1 куб.см, вносят в колбу несколько капель ДБФ (ДОФ) - приблизительно 0,05 куб.см. Колбу заново взвешивают с той же точностью. Раствор в колбе доводят до метки этиловым спиртом. Точную концентрацию ДБФ (ДОФ) в растворе (C, мкг/куб.см) рассчитывают по формуле:

                                            -6
                              (M  - M ) x 10
                                2    1
                          C = ----------------,                         (1)
                                     V

где: M  - вес колбы со спиртом без вещества, г;
      1

     M  - вес колбы со спиртом и веществом, г;
      2

     V - объем мерной колбы, куб.см.

Основные стандартные растворы устойчивы при хранении в мерных колбах в холодильнике в течение 6 месяцев.

     8.2. Рабочий стандартный раствор N 2 с концентрацией ДБФ 10 мкг/куб.см
готовят  из  основного  стандартного  раствора  N 1, объем  которого (V   )
                                                                       ДБФ

рассчитывают по формуле:

                         V    = 10 x 100 / C,                           (2)
                          ДБФ

где: 10 - заданная концентрация, мкг/куб.см;
     100 - объем мерной колбы, куб.см;
     C  -  точная   концентрация   основного   стандартного  раствора  N 1,
мкг/куб.см.
     Рассчитанный объем основного стандартного раствора N 1 (V   ) пипеткой
                                                              ДБФ

вносят  в  мерную  колбу  вместимостью 100 куб.см, объем в колбе доводят до
метки этиловым спиртом. Раствор устойчив в течение месяца в холодильнике.
     8.3.   Рабочий  стандартный  раствор  N  4  с  концентрацией  ДОФ  100
мкг/куб.см  готовят  из основного стандартного раствора N 3, объем которого
V    рассчитывают по формуле:
 ДОФ

                         V    = 100 x 100 / C,                          (3)
                          ДОФ

где: 100 - заданная концентрация ДОФ, мкг/куб.см;
     100 - объем мерной колбы, куб.см;
     C   -   точная   концентрация  основного  стандартного  раствора  N 3,
мкг/куб.см.

Рассчитанный объем основного стандартного раствора N 3 (ДОФ) пипеткой вносят в мерную колбу вместимостью на 100 куб.см, объем в колбе доводят до метки этиловым спиртом. Раствор устойчив в течение месяца в холодильнике.

8.4. Приготовление градуировочных растворов ДБФ.

0,1; 0,2; 0,25; 0,4 и 0,5 куб.см рабочего стандартного раствора N 2 пипеткой на 1 куб.см помещают в пробирки с пришлифованными пробками вместимостью на 15 куб.см, доводят объем в пробирке до 10 куб.см водой дистиллированной. Концентрация ДБФ в растворе составляет соответственно 0,1; 0,2; 0,25; 0,4; 0,5 мкг/куб.см.

8.5. Приготовление градуировочных растворов ДОФ.

0,1; 0,2; 0,25; 0,3; 0,4 куб.см стандартного раствора N 4 пипеткой на 1 куб.см помещают в пробирки с пришлифованными пробками вместимостью 15 куб.см, доводят дистиллированной водой до 10 куб.см. Концентрация ДОФ в растворе соответственно 1; 2; 2,5; 3; 4 мкг/куб.см.

8.6. Установление градуировочной характеристики.

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость высоты хроматографического пика от концентрации вещества в растворе, устанавливают по пяти сериям из пяти растворов. В пробирки с градуировочными растворами (п 8.4 или 8.5) всыпают по 0,1 - 0,2 г хлорида натрия и вливают пипеткой по 1 куб.см толуола, закрыв пробирку пробкой, энергично встряхивают ее в течение 3 - 5 мин. После четкого расслаивания двух растворов в пробирке хроматографируют верхний толуольный слой, беря его аликвоту, в соответствии со следующими условиями:

     Температура испарителя               250 °C
     Температура детектора                230 °C
     Температура термостата колонок       210 °C
     Расход газа-носителя азота           30 куб.см/мин
     Объем вводимой пробы                 2 мкл
     Скорость протяжки ленты самописца    0,6 см/мин
     Время удерживания ДБФ                2 мин
     Время удерживания ДОФ                7 мин

Каждый градуировочный раствор хроматографируют дважды.

Измеряют высоты пиков ДБФ (ДОФ). Из двух хроматографических пиков ДБФ (ДОФ) вычисляют его среднюю величину. Для установления градуировочной характеристики вычисляют среднее значение результатов пяти параллельных определений для каждого градуировочного раствора.

Наклон градуировочного графика для каждого вещества определяется градуировочным коэффициентом прибора, который вычисляют по формуле:

                            a  = c / h,                                 (4)
                             i

где: a  - градуировочный коэффициент, мкг/мм;
      i

     c - содержание ДБФ (ДОФ) в 1 куб.см толуольного экстракта, мкг;
     h - высота пика ДБФ (ДОФ), мм.
     Градуировочный  коэффициент вычисляют по средним значениям пяти серий,
каждая  из  которых  состоит  из пяти концентраций. Таким образом, получают
пять значений величины а , а затем находят ее среднюю величину по формуле:
                        i

                               5
                              SUM a
                              i=1  i                                    (5)
                        a   = ------.
                         cp     5

В данном случае можно использовать метод наименьших квадратов. Градуировочный коэффициент определяется для ДБФ и ДОФ отдельно.

9. Отбор проб

В соответствии с Инструкцией 2.3.3.10-15-64-2005 "Санитарно-химические исследования изделий, изготовленных из полимерных и др. синтетических материалов, контактирующих с пищевыми продуктами" выбирают соответствующую модельную среду. Каждой модельной средой заливается по две пробы исследуемого образца. После соответствующей экспозиции сливается в вытяжки одного вида модельной среды, отбирается по две пробы каждой усредненной вытяжки.

10. Выполнение измерений ДБФ (ДОФ)

Две пробы по 10 куб.см модельного раствора, приготовленного по п. 9, пипеткой на 10 куб.см вносят в пробирки вместимостью 15 куб.см; добавляют по 0,1 - 0,2 г хлорида натрия и по 1 куб.см толуола. Закрывают пробирки пробками и энергично встряхивают в течение 3 - 5 мин. После разделения слоев 2 мкл верхнего толуольного слоя вводят в испаритель хроматографа. Каждый раствор хроматографируют дважды. Измеряют высоту пиков ДБФ (ДОФ). Определяют среднюю величину хроматографического пика. Из одной пробы можно одновременно определять ДБФ и ДОФ, используя для расчета свой градуировочный коэффициент для каждого вещества.

11. Обработка результатов измерения

Массовую концентрацию ДБФ (ДОФ) С (мкг/куб.см, мг/куб.дм) рассчитывают по формуле:

                                    a x h
                                C = -----,                              (6)
                                      10

где: h - высота пика ДБФ (ДОФ), мм;
     A - градуировочный коэффициент по ДБФ (ДОФ), мкг/мм;
     10 - объем пробы, взятой для анализа, куб.см.

За окончательный результат анализа принимают среднеарифметическое двух параллельных определений, расхождение между которыми не должно превышать 20% для ДБФ (ДОФ) по отношению к среднему значению.

Гарантированный результат анализа представляют в следующем виде:

                          C  =  C   +/- QМВИ,
                                 ср

где  QМВИ - суммарная погрешность результатов измерения, равная 19% для ДБФ
и  16%  для  ДОФ,  которую  необходимо  перевести  в  абсолютные единицы по
формуле:

                                 Q x C
                                      cp
                                 -------.                               (7)
                                   100

--------------------------------

Q - греческая буква "дельта"

Измерение концентрации ДБФ (ДОФ) по данной методике можно проводить одновременно, рассчитав предварительно коэффициент а для каждого из этих веществ.

12. Контроль погрешности МВИ

Внутренний оперативный контроль (ВОК) показателей качества измерений концентраций ДБФ (ДОФ) в модельных средах методом газожидкостной хроматографии осуществляют с целью получения оперативной информации о качестве этих анализов и принятии при необходимости оперативных мер по его повышению, ВОК осуществляют по четырем показателям: стабильности градуировочной характеристики, сходимости результатов параллельных измерений, воспроизводимости КХА, точности результатов анализов.

Нормативы оперативного контроля для МВИ концентрации ДБФ (ДОФ) в модельных средах

---------------------------+-------------------------+----------------
¦   Норматив сходимости    ¦        Норматив         ¦      Точность      ¦
¦ результатов параллельных ¦    воспроизводимости    ¦результатов анализа ¦
¦     определений d, %     ¦  результатов КХА D, %   ¦        К, %        ¦
+--------------------------+-------------------------+--------------------+
¦          ДБФ-20          ¦         ДБФ-19          ¦       ДБФ-19       ¦
¦          ДОФ-20          ¦         ДОФ-13          ¦       ДОФ-16       ¦
¦--------------------------+-------------------------+---------------------

12.1. Средства контроля погрешности методики выполнения измерений.

В качестве средств контроля в процессе определения показателей качества результатов анализа применяются: для контроля стабильности градуировочной характеристики - градуировочные растворы, приготовленные по п. 8.4, для контроля сходимости и воспроизводимости - пробы, содержащие ДБФ (ДОФ).

12.2. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят при смене основных реактивов, но не реже одного раза в месяц. При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерение не менее трех образцов концентраций для градуировки, содержание ДБФ (ДОФ) должно охватывать весь диапазон концентраций 0,1 - 0,5 мг/куб.дм для ДБФ и 1 - 4 мг/куб.дм для ДОФ.

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемых для контроля градуировочных растворов сохраняется соотношение:

                           (X - C) x 100
                       A = ------------- <= 12% для ДБФ (ДОФ),
                                C

где: X - концентрация ДБФ (ДОФ) контрольного измерения, мг/куб.дм;
     C  - известная концентрация градуировочной смеси ДБФ (ДОФ), взятая для
контроля стабильности градуировочной характеристики, мг/куб.дм;
     12  -  погрешность градуировочной характеристики для ДБФ (ДОФ), %.

Если величина расхождения (А) превышает 12%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других образцов смеси для градуировки. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики определяют ее заново согласно п. 8.4.

     12.3.  Сходимость  результатов определения (d ) концентрации ДБФ (ДОФ)
                                                  k

проводят  путем  расхождения результатов двух параллельных определений (d).
Должно выполняться следующее соотношение:

                                                    d  x 100
                                                     k
         d  = x  - x  <= d,     (8)           d % = --------,           (9)
          k    1    2                          k       x
                                                        cp

где: d - норматив сходимости;
     x , x - результаты параллельных измерений, мг/куб.дм.
      1   2

     Если d  <= d,  то  сходимость  результатов   параллельных  определений
           k

признают  удовлетворительной  и  по  ним  может  быть  рассчитан  результат
измерений при рабочих измерениях и контрольном измерении.
     Если  d  > d, то  рабочая  или  контрольная  проба подлежит повторному
            k

измерению.   При   повторном  превышении  указанного  норматива  необходимо
выяснить   причины,   приводящие   к  неудовлетворительным  результатам,  и
устранить их.

12.4. Контроль воспроизводимости результатов измерений проводится не реже 2 - 3 раз в месяц с использованием рабочих проб, контроль воспроизводимости обязателен при смене партии реактивов, посуды, после ремонта оборудования, существенных изменений условий выполнения измерений.

     Контроль   воспроизводимости  проводится  путем   сравнения результата
контрольной процедуры D , равного расхождению двух результатов измерений  -
                       1

первичного (Х   ) и повторного (Х   ) - содержания ДБФ  (ДОФ) в одной и той
             1cp                 2cp

же рабочей пробе с нормативом воспроизводимости D (табл. 1).

Первичный и повторный результаты измерений должны быть получены в разных условиях, например двумя операторами в один или разные дни. D1 рассчитывают по формуле:

                                                   D  x 100
                                                    1
       D  = X    - X   ,    (10)              D1 = --------,           (11)
        1    1cp    2cp                               x
                                                       cp

где: X    - первичный результат измерения рабочей пробы;
      1cp

     X    - повторный результат измерения рабочей пробы.
      2cp

     Величины  X    и X    должны  быть  получены   с  соблюдением  условий
                1cp    2cp

сходимости.

Если D1 <= D, то воспроизводимость контрольных измерений признается удовлетворительной. В этом случае воспроизводимость результатов измерений рабочих проб, полученных в условиях, соответствующих требованиям МВИ, признается удовлетворительной.

     В  случае  превышения  норматива  воспроизводимости,  когда  D   >  D,
                                                                   1

контроль  повторяют.  При  повторном превышении указанного норматива должны
быть  выяснены  и  устранены  причины,  приводящие  к  неудовлетворительным
результатам контроля воспроизводимости.

12.5. ВОК точности осуществляют с использованием метода добавок. Образцами для контроля являются рабочие пробы и эти же пробы с добавкой любой градуировочной смеси. К пробе с добавкой предъявляются следующие требования: добавка должна вводиться в пробу на самой ранней стадии измерений; проба с введенной добавкой не должна выходить за верхнюю границу определяемого диапазона концентраций ДБФ (ДОФ) согласно МВИ.

Контроль точности проводится по результатам измерения пробы до
введения добавки (Х ) и после введения добавки градуировочной смеси
пр

(Х ) концентрации С в исходную пробу. Разница (К ) между
пр доб. доб. к

найденной /Х - Х / и введенной (С ) концентрацией добавки не
пр доб. пр доб.

должна превышать по абсолютной величине значения норматива точности
К (табл. 1).

К = /Х - Х - С / < К. (12)
к пр доб. пр доб.

Если для расчета используются относительные значения погрешностей Q,
то относительное значение К рассчитывается по формуле:
к

К x 100
к
К = --------. (13)
к.отн. С
доб.

--------------------------------
Q - греческая буква "дельта"

Точность контрольных измерений, а также точность результатов измерений
рабочих проб, выполненных в условиях соблюдения требований МВИ, признается
удовлетворительной, если /К / < К.
к

Если /К / > К, то точность контрольных измерений признается
к

неудовлетворительной и процедура контроля повторяется с использованием
другой рабочей пробы. При повторном получении неудовлетворительных
результатов контроля точности выясняют и устраняют причины, приводящие к
неудовлетворительным результатам контроля.

5.4. Определение пероксидов

1. Общие сведения

В качестве вулканизирующих агентов при изготовлении силиконовых резин применяются пероксиды: перекись дикумила, перекись П-5, пероксимон Р-40.

В данном разделе представлены методики определения перекиси дикумила и продукта его превращения - ацетофенона.

Перекись дикумила

     C18H22O2                                Молекулярная масса - 270,37

Перекись дикумила (Бис - (альфа, альфа-диметилбензил) пероксид) - белый или светло-желтый кристаллический порошок без запаха. Плотность - 1530 кг/куб.м. Температура плавления - 39 - 42 °C. Растворим в ацетоне, спиртах, растительных маслах. Нерастворим в воде.

Катализатор полимеризации в производстве полистиролов.

     Ацетофенон                              Молекулярная масса - 120,00

Ацетофенон (ацетилбензол) - жидкость со специфическим запахом. Удельный вес - 1,003. Температура кипения - 202 °C. Растворим в ацетоне, спиртах, растительных маслах. Нерастворим в воде.

2. Принцип метода

Методика, представленная в настоящей Инструкции, основана на предварительном выделении пероксидов из вытяжек путем экстрагирования органическими растворителями, концентрирования и хроматографирования методом ТСХ.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства и реактивы

     Весы аналитические типа ВЛА-200                      ГОСТ 24104-2001
     Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2,
     пределы - 100 °C, цена деления - 1 °C
     Набор гирь Г-2-210                                   ГОСТ 7328-2001
     Шкаф  сушильный  электрический,  обеспечивающий  поддержание заданного
температурного режима от 40 до 150 °C с температурной погрешностью +/-5 °C
     Холодильник Либиха                                   ГОСТ 25336-82
     Баня водяная                                         ГОСТ 9147-80
     Колбы мерные на 100 мл                               ГОСТ 1770-74
     Колбы плоскодонные конические                        ГОСТ 25336-82
     Воронки делительные ВД2-250                          ГОСТ 25336-82
     Цилиндры мерные вместимостью 10 - 250                ГОСТ 1770-74
     Колбы круглодонные                                   ГОСТ 25336-82
     Стаканы химические                                   ГОСТ 19908-80
     Фарфоровые чашки                                     ГОСТ 9147-80Е
     Микрошприцы МШ-10М                                   ТУ 2.833.106
     Ротационный   испаритель   IKA   RV05  basic,  оснащенный  регулятором
температуры и давления, производства фирмы IKA, Германия
     Насос водоструйный                                   ГОСТ 25336-82
     Стеклянные  сосуды  с  притертой  пробкой  или  с плотно закрывающейся
стеклянной пластинкой (емкости для приготовления вытяжек из резин)
     Стеклянные камеры для ТСХ с притертыми крышками
     Распылитель стеклянный с грушей
     Устройство для сушки пластин тонкослойной хроматографии УСП-1
     Пластины  для  ТСХ  "Silufol"  (Чехия) или "Сорбфил" (Россия) размером
15 x 15 или 20 x 20 см
     Фильтры бумажные обеззоленные                        ТУ 6-09-1678-86

Необходимые реактивы

1. Хлороформ по ГОСТ 20015-88.

2. Бензол по ГОСТ 5955-75.

3. Ацетон по ГОСТ 2603-79.

4. Ксилол по ГОСТ 9949-76.

5. Стандартные растворы пероксида и ацетофенола в хлороформе, концентрацией 100 мкг/мл, устойчивы в течение 10 дней.

6. Аммоной роданистый по ГОСТ 19522-74.

7. Железо сернокислое по ГОСТ 9485-74.

8. 2,4-динитрофинилгидразин солянокислый по ТУ 6-09-2394.

9. Кислота соляная по ГОСТ 3118-77.

10. Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

11. Подвижные фазы:

а) ксилол;

б) бензол;

в) бензол:ацетон (4:1).

12. Проявляющие (окрашивающие) реагенты.

12.1. Раствор роданистого аммония в ацетоне, содержащий сульфат железа. Способ приготовления: 10 мл свежеприготовленного 2% раствора роданистого аммония в ацетоне смешивают перед употреблением с 0,07 г сульфата железа.

12.2. 2,4-динитрофенилгидразин солянокислый. Способ приготовления: 150 мг 2,4-динитрофенилгидразина растворяют в смеси 22 мл конц. соляной кислоты и 25 мл воды. Смесь разбавляют до 100 мл водой.

4. Требования безопасности

5. Требования к квалификации оператора

6. Условия выполнения измерений

температура воздуха - 20 +/- 5 °C;

атмосферное давление - 84,0 - 106,7 кПа (630 - 800 мм рт.ст.);

влажность воздуха - не более 80% при температуре 25 °C.

7. Ход определения

Подготовку хроматографических камер и пластинок необходимо проводить по разделу 5 "Общие приемы работы методом ТСХ" настоящей Инструкции.

Для определения 100 мл вытяжки экстрагируют в делительной воронке 3 раза по 5 минут, используя 25 мл хлороформа на каждую экстракцию.

Хроматографирование на пластинках "Силуфол" осуществляется согласно разделу 5, используя при этом ПФ и проявляющие (окрашивающие) реагенты, представленные в таблице 4 (приложение 9).

Для перекиси дикумила после хроматографии и высушивания пластинки на воздухе до полного испарения растворителя пластинку помещают на 1 мин в сушильный шкаф при температуре 135 °C, вынимают и сразу опрыскивают проявляющим реагентом.

Идентификация и количественное определение - по разделу 5 настоящей Инструкции.

Предел обнаружения - 0,01 - 0,02 мг/л.

5.5. Определение неионогенного поверхностно-активного вещества (ОП-10)

1. Общие сведения

Полиэтиленгликолевый эфир изооктилфенола - ОП-10 - маслянистая вязкая жидкость или легкоплавкая паста коричневого цвета CnH2n+i C6H4O (C2H4O)mH с молекулярной массой ~= от 584 до 690. Хорошо растворим в воде.

2. Принцип метода

Методика, представленная в настоящей Инструкции, основана на предварительном выделении неионогенного поверхностно-активного вещества (ПАВ) из вытяжек путем экстрагирования органическими растворителями, концентрирования и хроматографирования методом ТСХ.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства и реактивы

     Весы аналитические типа ВЛА-200                ГОСТ 24104-2001
     Набор гирь Г-2-210                             ГОСТ 7328-2001
     Шкаф  сушильный  электрический,  обеспечивающий  поддержание заданного
температурного режима от 40 до 150 °C с температурной погрешностью +/-5 °C
     Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2,
     пределы - 100 °C, цена деления - 1 °C
     Холодильник Либиха                             ГОСТ 25336-82
     Баня водяная                                   ГОСТ 9147-80
     Колбы мерные на 100 мл                         ГОСТ 1770-74
     Колбы плоскодонные конические                  ГОСТ 25336-82
     Воронки делительные ВД2-250                    ГОСТ 25336-82
     Цилиндры мерные вместимостью 10 - 250          ГОСТ 1770-74
     Колбы круглодонные                             ГОСТ 25336-82
     Стаканы химические                             ГОСТ 19908-80
     Фарфоровые чашки                               ГОСТ 9147-80Е
     Микрошприцы МШ-10М                             ТУ 2.833.106
     Ротационный   испаритель   IKA   RV05  basic,  оснащенный  регулятором
температуры и давления, производства фирмы IKA, Германия
     Насос водоструйный                             ГОСТ 25336-82
     Стеклянные  сосуды  с  притертой  пробкой  или  с плотно закрывающейся
стеклянной пластинкой (емкости для приготовления вытяжек из резин)
     Стеклянные камеры для ТСХ с притертыми крышками
     Распылитель стеклянный с грушей
     Устройство для сушки пластин тонкослойной хроматографии УСП-1
     Пластины  для  ТСХ  "Silufol"  (Чехия) или "Сорбфил" (Россия) размером
15 x 15 или 20 x 20 см
     Фильтры бумажные обеззоленные                  ТУ 6-09-1678-86

Необходимые реактивы

1. Хлороформ по ГОСТ 20015-88.

2. Висмут азотнокислый, основной по ГОСТ 4110-75.

3. Калий йодистый по ГОСТ 4232-74.

4. Оксид алюминия для хроматографии, активность по Брокману II по ГОСТ 8136-85.

5. Спирт этиловый по ГОСТ 18300-87.

6. Стандартный раствор ОП-10 в хлороформе, концентрация - 100 мкг/мл, устойчив в течение 7 дней.

7. Подвижная фаза: хлороформ-этанол (50:1,5).

8. Проявляющий (окрашивающий) реагент: реактив Драгендорфа.

Способ приготовления:

Реактив А. Растворяют 0,85 г основного азотнокислого висмута в 10 мл ледяной уксусной кислоты и 40 мл дистиллированной воды.

Реактив Б. Растворяют 8 г йодистого калия в 20 мл дистиллированной воды.

Смешивают растворы А и Б. Полученный раствор устойчив в течение нескольких месяцев.

Реактив В. Готовят непосредственно перед употреблением: к 1 мл смеси растворов А и Б добавляют 10 мл дистиллированной воды, 2,0 мл ледяной уксусной кислоты и затем по каплям концентрированную соляную кислоту, пока раствор не станет прозрачным.

Раствор В используют для проявления хроматограммы, устойчив несколько дней.

Могут быть использованы другие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы по техническим и метрологическим характеристикам не уступающие указанным в настоящей Инструкции.

4. Требования безопасности

5. Требования к квалификации оператора

6. Условия выполнения измерений

температура воздуха - 20 +/- 5 °C;

атмосферное давление - 84,0 - 106,7 кПа (630 - 800 мм рт.ст.);

влажность воздуха - не более 80% при температуре 25 °C.

7. Ход определения

Для определения 100 мл вытяжки экстрагируют в делительной воронке 3 раза по 5 минут, используя по 10 мл хлороформа на каждую экстракцию. Хлороформные экстракты сливают в фарфоровую чашку или в колбу и удаляют растворитель до объема 0,1 - 0,3 мл (из колбы растворитель отгоняют с холодильником Либиха на водяной бане с температурой 85 °C или на ротационном испарителе; из чашки испарением на воздухе при комнатной температуре в вытяжном шкафу). Хроматографирование на пластинках с оксидом алюминия в незакрепленном слое осуществляется по разделу 5. Через 5 минут после нанесения раствора пластинку помещают в хроматографическую камеру под углом 10 - 17° по отношению к горизонтальной плоскости. В камеру предварительно наливают подвижную фазу (хлороформ-этанол (50:1,5)). Нижний край пластинки погружают в растворитель на 5 - 7 мм. Проявление заканчивается, когда фронт растворителя достигает верхнего края пластины. Пластину вынимают из камеры и, не давая ей подсохнуть, опрыскивают реактивом Драгендорфа. ОП-10 обнаруживается на хроматографической пластине в виде ярко-оранжевых пятен.

Идентификация и количественное определение - по разделу 5 настоящей Инструкции.

Предел обнаружения: 0,02 мг/л.

5.6. Определение ионов цинка

1. Общие сведения

     Цинк (Zn)                                      Атомная масса - 65,39

Цинк - синевато-белый металл средней твердости, на воздухе покрывается защитной пленкой. Реагирует с кислотами и щелочами, аммиаком, солями аммония, с влажными Cl2 и Br2 при нагревании с кислородом. В воде растворяются следующие соли цинка: хлорид ZnCl2, сульфат ZnSO4, нитрат Zn(NO3)2; не растворяются карбонат ZnSO3 и оксид цинка ZnO. Относится к 3-му классу опасности.

Ряд соединений цинка используется в качестве стабилизаторов пластмасс. Применяется как компонент сплавов; для цинкования стали и чугуна.

2. Принцип метода

Метод, изложенный в настоящей Инструкции, основан на образовании комплексных соединений ионов цинка с диэтилдитиокарбаминатом натрия с последующей экстракцией этого комплекса из анализируемых растворов хлороформом и хроматографирования их в тонком слое на пластинках типа "Силуфол".

Допускаются пробоподготовка и определение цинка в вытяжках из резин и пищевых продуктах по ГОСТ 26929 "Сырье и продукты пищевые. Подготовка проб. Минерализация для определения содержания токсичных элементов" и ГОСТ 30178 "Сырье и продукты пищевые. Атомно-абсорбционный метод определения токсичных элементов".

3. Средства измерений, вспомогательные устройства и реактивы

     Весы аналитические типа ВЛА-200                        ГОСТ 24104-2001
     Набор гирь Г-2-210                                     ГОСТ 7328-2001
     Шкаф  сушильный  электрический,  обеспечивающий  поддержание заданного
температурного режима от 40 до 150 °C с температурной погрешностью +/-5 °C
     Баня водяная                                           ГОСТ 9147-80
     Колбы мерные на 100 мл                                 ГОСТ 1770-74
     Колбы плоскодонные конические                          ГОСТ 25336-82
     Колбы круглодонные                                     ГОСТ 25336-82
     Ротационный   испаритель   IKA   RV05  basic,  оснащенный  регулятором
температуры и давления производства фирмы IKA, Германия
     Насос водоструйный                                     ГОСТ 25336-82
     Воронки делительные ВД2-250                            ГОСТ 25336-82
     Цилиндры мерные вместимостью 10 - 250                  ГОСТ 1770-74
     Стаканы химические                                     ГОСТ 19908-80
     Фарфоровые чашки                                       ГОСТ 9147-80Е
     Микрошприцы МШ-10М                                     ТУ 2.833.106
     Стеклянные  сосуды  с  притертой  пробкой  или  с плотно закрывающейся
стеклянной пластинкой (емкости для приготовления вытяжек из резин)
     Стеклянные камеры для ТСХ с притертыми крышками
     Распылитель стеклянный с грушей
     Устройство для сушки пластин тонкослойной хроматографии УСП-1
     Пластины  для  ТСХ  "Silufol"  (Чехия) или "Сорбфил" (Россия) размером
15 x 15 или 20 x 20 см
     Фильтры бумажные обеззоленные                          ТУ 6-09-1678-86
     Бумага индикаторная универсальная для контроля pH      ТУ 6-09-1181-76

Необходимые реактивы и растворы

1. Хлороформ по ГОСТ 20015-88.

2. Бензол по ГОСТ 5955-75.

3. Дитизон по ТУ 6-09-07-1684.

Способ приготовления дитизона: 0,05 г дитизона растворяют в 100 мл хлороформа, фильтруют через бумажный фильтр (синяя лента) в делительную воронку вместимостью 500 мл. Полученный раствор экстрагируют водным раствором аммиака (1:50), хлороформный слой отбрасывают. Аммиачный раствор дитизона (оранжево-красный цвет) промывают, используя каждый раз 10 мл хлороформа до исчезновения оранжево-красной окраски хлороформного слоя. Затем приливают 50 мл хлороформа и нейтрализуют слой до слабо-кислой среды раствором соляной кислоты (1:1) по индикаторной бумаге. Дитизон переходит в хлороформный слой, который отделяют и промывают несколько раз дистиллированной водой. Хлороформный раствор дитизона переносят в колбу вместимостью 250 мл и доводят до метки хлороформом.

Концентрация раствора дитизона - 0,02%. Раствор дитизона хранят в посуде из темного стекла с притертой пробкой. Полученный реактив для проявления ионов цинка считается непригодным, если окраска из зеленой переходит в желто-коричневую.

4. Диэтилдитиокарбаминат натрия по ГОСТ 8864-71 - 2% водный раствор.

5. Натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166-76.

6. Подвижные фазы:

6.1. бензол;

6.2. бензол:гексан (5:1).

7. Проявляющие реагенты:

7.1. 0,02% раствор дитизона в хлороформе;

7.2. 5% водный раствор сернокислой меди.

8. Кислота соляная по ГОСТ 3118-77, разбавленная в соотношении (1:1).

9. Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

10. Цинк хлористый по ГОСТ 4529-78.

Водный раствор с содержанием ионов цинка - 1 мг/мл.

Стандартный раствор с содержанием ионов цинка - 200 мкг/мл.

Способ приготовления. В делительную воронку переносят 100 мл дистиллированной воды, доводят до рН 4,5 - 5,0 разбавленным раствором соляной кислоты по индикаторной бумаге, добавляют 10 мл раствора цинка (с содержанием 1 мг/мл), 2 мл 2% водного раствора диэтилдитиокарбамита натрия.

Образовавшийся комплекс диэтилдитиокарбамината цинка экстрагируют трижды 10 мл хлороформа на каждую экстракцию.

Объединенный хлороформный экстракт пропускают через безводный сернокислый натрий, переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят до метки хлороформом и тщательно перемешивают.

Раствор хранят в темной склянке с притертой пробкой.

11. Гексан по ТУ 6-09-3375-78.

12. Медь сернокислая по ГОСТ 4165-78, 5% раствор.

4. Требования безопасности

5. Требования к квалификации оператора

6. Условия выполнения измерений

температура воздуха - 20 +/- 5 °C;

атмосферное давление - 84,0 - 106,7 кПа (630 - 800 мм рт.ст.);

влажность воздуха - не более 80% при температуре 25 °C.

7. Ход определения

В делительную воронку переносят 100 мл вытяжки, добавляют несколько капель разбавленной соляной кислоты до создания рН 4,5 - 5,0 (по универсальной индикаторной бумаге), 1 мл 2% раствора диэтилдитиокарбамината натрия и перемешивают. Образовавшийся комплекс диэтилдитиокарбаманата цинка экстрагируют 3 раза по 5 мин со свежими порциями хлороформа объемом 5 - 10 мл. Объединенные экстракты фильтруют через слой безводного сульфата натрия и упаривают на водяной бане или на ротационном испарителе до 0,2 - 0,3 мл. Весь сконцентрированный раствор переносят на хроматографическую пластину "Силуфол", рядом наносят "свидетели". Хроматографируют по разделу 5, используя в качестве ПФ бензол или смесь бензол:гексан в соотношении 5:1.

После хроматографирования пластинку опрыскивают дитизоном и помещают в сушильный шкаф с температурой 100 - 120 °C и выдерживают в течение 5 - 10 мин.

Цинк на пластинке проявляется в виде розово-сиреневых пятен (дитизонат цинка) с величиной Rf = 0,8 +/- 0,05.

При использовании ПФ бензол:гексан в соотношении 5:1 и проявляющего реагента 5% водного раствора сернокислой меди цинк обнаруживается в виде коричнево-зеленых пятен с Rf = 0,5 +/- 0,04.

Идентификация и количественное определение - по разделу 5 настоящей Инструкции.

Предел обнаружения - 0,005 мг/л.

5.7. Методы определения бария

     Барий Ва                                   Молекулярная масса - 137,33

Барий Ва - щелочно-земельный металл, серебристо-белый, сравнительномягкий, на воздухе быстро покрывается пленкой оксида ВаО и пероксида ВаO2. Энергично реагирует с водой, кислотами.

Допускаются пробоподготовка и определение бария в вытяжках из резин и пищевых продуктах атомно-абсорбционным методом.

5.7.1. Качественное определение бария с серной кислотой

1. Принцип метода

Метод, изложенный в настоящей Инструкции, основан на образовании сернокислого бария в результате взаимодействия ионов бария с серной кислотой с последующим визуальным определением появления мути или осадка.

2. Средства измерений, вспомогательные устройства и реактивы

     Весы аналитические типа ВЛА-200                ГОСТ 24104-2001
     Набор гирь Г-2-210                             ГОСТ 7328-2001
     Печь муфельная МИМП-П                          ТУ 3442.002.24662585-01
     Баня водяная                                   ГОСТ 9147-80
     Колбы мерные                                   ГОСТ 1770-74
     Пипетки                                        ГОСТ 29227-91
     Пробирки                                       ГОСТ 1770-74
     Цилиндры мерные вместимостью 10 - 250          ГОСТ 1770-74
     Стаканы химические                             ГОСТ 19908-80
     Фарфоровые чашки                               ГОСТ 9147-80Е
     Штатив лабораторный                            ТУ 64-1.707-76
     Стеклянные  сосуды  с  притертой  пробкой  или  с плотно закрывающейся
стеклянной пластинкой (емкости для приготовления вытяжек из резин)
     Фильтры бумажные обеззоленные                  ТУ 6-09-1678-86

Необходимые реагенты

1. Кислота соляная по ГОСТ 3118-77, 10% раствор.

2. Кислота серная по ГОСТ 4204-77, концентрированная.

3. Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

3. Требования безопасности

4. Требования к квалификации оператора

5. Условия выполнения измерений

температура воздуха - 20 +/- 5 °C;

атмосферное давление - 84,0 - 106,7 кПа (630 - 800 мм рт.ст.);

влажность воздуха - не более 80% при температуре 25 °C.

6. Ход определения

50 мл вытяжки переносят в фарфоровую чашку и выпаривают досуха на водяной или песочной бане. Сухой остаток озоляют в муфеле при температуре 550 - 600 °C (до получения золы белого или светло-кремового цвета).

Охлажденную золу растворяют в 3 мл 10% раствора соляной кислоты (если раствор мутный, его фильтруют), переносят в пробирку и добавляют 1 - 2 капли концентрированной серной кислоты. Появление мути или осадка указывает на присутствие бария (сернокислый барий).

Предел обнаружения - 3 мг/л.

5.7.2. Определение бария спектрофотометрическим методом

1. Принцип метода

Метод, изложенный в настоящей Инструкции, основан на фотометрировании окрашенного комплекса бария с нитхромазо в видимой области спектра.

2. Средства измерений, вспомогательные устройства и реактивы

     Весы аналитические типа ВЛА-200               ГОСТ 24104-2001
     Набор гирь Г-2-210                            ГОСТ 7328-2001
     Спектрофотометр    СФ-26    или   фотоэлектроколориметр   с   фильтром
максимальной   проницаемостью  в  диапазоне  640  нм  с  кюветами  толщиной
поглощающего свет слоя 1 см
     Колбы мерные                                  ГОСТ 1770-74
     Пипетки                                       ГОСТ 29227-91
     Цилиндры мерные вместимостью 10 - 250         ГОСТ 1770-74
     Стаканы химические                            ГОСТ 19908-80
     Колонка хроматографическая для ионообменной смолы
     Стеклянные  сосуды  с  притертой  пробкой  или  с плотно закрывающейся
стеклянной пластинкой (емкости для приготовления вытяжек из резин)

Необходимые растворы и реактивы

1. Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

2. Спирт этиловый по ГОСТ 18300-87.

3. Кислота соляная по ГОСТ 3118-77-1Н раствор.

4. Барий азотнокислый по ГОСТ 3777-76.

5. Нитхромазо по МРТУ 6-09-6514-70.

6. Катионообменная смола КУ-2 по ГОСТ 20298-74

Способ приготовления раствора реагента: 0,17 г нитхромазо растворяют в 50 мл дистиллированной воды и раствор пропускают через колонку с ионообменной смолой КУ-2 в H+ форме.

     Элюат  собирают в мерную колбу  вместимостью 200 мл и, после того, как
колонка   будет   полностью   отмыта   от   реагента,   доводят   до  метки

                                                             -2
дистиллированной водой. Концентрация раствора нитхромазо - 10   М.

7. Стандартный раствор соли бария

Способ приготовления: точную навеску 0,0239 г азотнокислого бария растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе емкостью 500 мл. В 1 мл приготовленного раствора содержится 25,00 мкг бария.

Построение калибровочного графика

     В  мерные колбы вместимостью 25 мл последовательно переносят 0,5; 1,0;
1,5 мл  и т.д. стандартного раствора  бария. В каждую колбу  добавляют 1 мл

              -3
нитхромазо (10   М); 0,5 мл 1 Н раствора соляной кислоты, 10 мл этанола или
10 мл  ацетона, доводят раствор до метки дистиллированной водой и тщательно
перемешивают.  Определяют оптическую плотность на спектрофотометре (СФ-26 и
др.) относительно реагента при длине волны L = 640 нм. Калибровочный график
строят  в  координатах  оптическая плотность - содержание бария в растворе,
мкг/мл. Предел - обнаружения 0,3 мг/л.

     --------------------------------
     L - греческая буква "ламбда"

3. Требования безопасности

4. Требования к квалификации оператора

5. Условия выполнения измерений

температура воздуха - 20 +/- 5 °C;

атмосферное давление - 84,0 - 106,7 кПа (630 - 800 мм рт.ст.);

влажность воздуха - не более 80% при температуре 25 °C.

6. Ход определения

     В   мерную  колбу  вместимостью  25 мл   переносят  2 - 5 мл  вытяжки,

                                                    -3
добавляют   последовательно   1 мл  нитхромазо   (10   М);   0,05 мл   1  Н
раствора соляной кислоты, 10 мл этанола или 10 мл ацетона, доводят до метки
дистиллированной  водой   и  тщательно   перемешивают.   После  20-минутной
выдержки   раствор   вновь  доводят  до   метки   дистиллированной   водой,
перемешивают  и  определяют  в кювете с толщиной слоя 10 мм при L = 640 нм.
Содержание бария находят по калибровочному графику и выражают в мг/л.

     --------------------------------
     L - греческая буква "ламбда"

Расход этилового спирта:

а) для построения калибровочного графика - 0,08 л;

б) для определения в вытяжке - 0,03 л.

5.8. Газохроматографический метод определения акрилонитрила в модельных средах и пищевых продуктах

1. Общие сведения

Нитрил акриловой кислоты (НАК)

     CH2=CHCN                              Молекулярная масса - 53,06
     Акрилонитрил   -   бесцветная   жидкость   со  специфическим  запахом,
напоминающим пиридин. Т     -  77,3 °C,  Т    -  84,5 °C.  Растворим в воде
                       кип.               пл.

(7,3%), эфире, этаноле.

В воздухе находится в виде паров. При соединении с водой образует амид акриловой кислоты, при полном гидролизе дает акриловую кислоту.

НАК относится к сильнодействующим веществам. Класс опасности - второй.

Предельно допустимая концентрация нитрила акриловой кислоты в воде хозяйственно-питьевого и культурно-бытового назначения составляет 2,0 мг/куб.дм.

Предельно допустимая среднесуточная концентрация нитрила акриловой кислоты в атмосферном воздухе составляет 0,02 мг/куб.м.

Предельно допустимая концентрация нитрила акриловой кислоты в воздухе рабочей зоны составляет 0,5 мг/куб.м.

Допустимое количество миграции нитрила акриловой кислоты из полимерных материалов в водные вытяжки и модельные среды, имитирующие пищевые продукты, - 0,02 мг/куб.дм.

Предел обнаружения акрилонитрила в вытяжках - 0,002 мг/куб.дм.

Относительная ошибка определения не превышает 15%.

2. Принцип метода

Метод основан на хроматографическом анализе парогазовой фазы после термостатирования водных вытяжек или модельных сред.

Термостатирование проводится в стеклянной герметично закрытой емкости до установления равновесия между жидкой и газовой фазами.

Важнейшее условие успешного применения парофазного газохроматографического анализа - строгое соблюдение тождественности условий термостатирования, дозирования и всех параметров хроматографирования при калибровке и анализе проб.

3. Средства измерения, вспомогательные устройства и реактивы

Средства измерений

     Хроматограф газовый с пламенно-ионизационным детектором
     Весы лабораторные ВЛР-200 аналитические       ГОСТ 24104-2001
     Разновесы Г2-210
     Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2,
     пределы - 0 - 100 °C, цена деления - 1 °C
     Микрошприцы МШ-10
     Шприцы медицинские
     Колбы мерные вместимостью 25 куб.см           ГОСТ 25336-82
     Пипетки вместимостью 0,1, 1,0 и 10 куб.см     ГОСТ 20292-74

Вспомогательные устройства

Дозатор равновесного пара "Хроматек", или ультратермостат, или водяная баня с контактным термометром.

Склянки вместимостью 40 куб.см (можно использовать аптечные пузырьки вместимостью 40 куб.см), закрывающиеся навинчивающейся крышкой, в которой просверлено отверстие для взятия проб шприцем. Для уплотнения в крышку вставляется прокладка из инертной термостойкой резины на основе силиконового каучука марки СКТ. Под резиновую прокладку помещают снизу фторопластовую пленку или алюминиевую фольгу для предотвращения процессов сорбции - десорбции между резиной и испытуемой пробой и снижения "фона".

Колонка хроматографическая 3000 x 3 мм.

Материалы

Аргон (ГОСТ 10157-79) высшего сорта или азот (ГОСТ 9293-4) газообразные.

Воздух сжатый (ГОСТ 17433-80).

Водород технический (ГОСТ 3022-80).

Реактивы

Нитрил акриловой кислоты технический (ГОСТ 11097-86).

Спирт этиловый ректификованный технический (ГОСТ 18300-87), 90%, перегнанный.

Твердый носитель диатоминовый, динохром-Н (ТУ 6-09-3958-75) или другие подходящие носители с частицами размером 0,2 - 0,315 мм (допускается использовать носитель с более мелким зернением).

Неподвижная фаза - полиэтиленгликольадипинат (ПЭГА), ч.д.а. или полиэтиленгликольсукцинат (ПЭГС), ч.д.а.

4. Требования безопасности

5. Требования к квалификации оператора

6. Условия выполнения измерений

температура воздуха - 20 +/- 5 °C;

атмосферное давление - 84,0 - 106,7 кПа (630 - 800 мм рт.ст.);

влажность воздуха - не более 80% при температуре 25 °C.

7. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: подготовка хроматографической колонки, приготовление стандартных градуировочных смесей, установление градуировочных характеристик.

Подготовка хроматографической колонки

Приготовленной насадкой заполняют чистую и сухую колонку хроматографа, закрывают ее концы тампоном из стекловолокна и присоединяют к газовой линии хроматографа. Для стабилизации продувают ее инертным газом в течение 18 ч при 150 °C, не соединяя колонку с детектором. После охлаждения колонку подключают к детектору, хроматограф выводят на рабочий режим.

Условия хроматографирования

     Температура колонки - 100 °C, испарителя  - 150 °C.
     Скорость газа-носителя (аргона или азота) - 30 куб.см/мин
     Скорость потока водорода                  - 30 куб.см/мин
     Скорость потока воздуха                   - 300 куб.см/мин
     Время удерживания акрилонитрила           - 3 мин 40 с

Допускается корректировка условий хроматографирования при использовании различных видов хроматографов с условием полного разделения компонентов смеси на хроматограммах (рис. 1).

Приготовление стандартных градуировочных смесей

Стеклянные медицинские шприцы перед анализом следует разобрать, промыть проточной водой и 2 - 3 раза прокипятить в дистиллированной воде, сливая и заменяя ее на свежую.

Микрошприцы промывают многократным (20 - 25 раз) прокачиванием растворителя, с которым предстоит работать (этанолом, водой и т.п.).

Стандартный раствор акрилонитрила в воде концентрацией от 0,3 до 0,5 мг/куб.см приготавливают следующим образом.

В колбу вместимостью 25 куб.см вносят 10 - 15 куб.см дистиллированной воды, взвешивают с точностью до 0,0002 г. После добавления 8 - 14 куб.мм акрилонитрила колбу вновь развешивают и доводят объем до метки дистиллированной водой. Концентрацию вещества в растворе находят путем деления разности двух взвешиваний на объем колбы.

Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику устанавливают методом абсолютной градуировки на стандартных растворах.

Построение градуировочного графика

Для построения градуировочного графика в склянку вместимостью 40 куб.см вносят 10 куб.см дистиллированной воды и плотно завинчивают ее крышкой, снабженной резиновой и тефлоновой прокладками. Вместо тефлоновой прокладки можно использовать алюминиевую фольгу. С помощью микрошприцев МШ-1 и МШ-10 путем прокалывания прокладок последовательно вводят в склянку стандартный раствор акрилонитрила в количествах 0,2; 0,6; 1,0; 3,0 и 5,0 куб.мм, приблизительно соответствующих концентрации акрилонитрила в растворах 0,005 - 0,15 мг/куб.дм. Перед дозированием каждого нового раствора микрошприц многократно промывают этим раствором.

При вводе стандартного раствора акрилонитрила в герметическую склянку конец иглы микрошприца МШ-1 или МШ-10 погружают в дистиллированную воду и во избежание барботирования смеси медленно опускают поршень. Затем склянку помещают в ультратермостат и термостатируют в течение 15 мин при 95 +/- 2 °C. Заранее подогретым шприцем типа "Рекорд" (для этого в промежутках между анализами шприц в разобранном виде кладут на ультратермостат или испаритель хроматографа) набирают 5 куб.см воздуха и вводят в склянку. Затем, не вынимая иглы из склянки, прокачивая воздух, отбирают 5 куб.см паровоздушной смеси и вводят ее в испаритель хроматографа. Перед отбором каждой последующей пробы баллон шприца многократно прокачивают сначала воздухом, а затем анализируемым паром внутри склянки. После отбора пробы пара ее необходимо сразу ввести в испаритель хроматографа, не допуская конденсации на стенках шприца.

На полученной хроматограмме измеряют высоты (Н, мм) или площади (S, кв.мм) зарегистрированных детектором пиков акрилонитрила и строят градуировочные графики зависимости H = f(C) или S = f(C), где C - концентрация искомого вещества в мг/куб.дм. Площадь пика рассчитывают как произведение высоты пика на ширину, измеренную на половине его высоты.

Градуировочный график строят по трем сериям растворов. Каждая серия состоит из пяти градуировочных растворов различной концентрации в заданном диапазоне. Каждый градуировочный раствор хроматографируют не менее трех раз, за результат принимают среднее арифметическое значение. Полученные данные используются для расчета коэффициентов регрессии a и b прямой Y = a + bX методом наименьших квадратов. График строится с учетом вычисленных значений уравнения, где X - концентрация определяемого вещества.

8. Выполнение измерений

Перед началом измерений проводят оперативный контроль градуировочного графика, используя 1 - 2 градуировочных раствора из диапазона измерений.

Полученные при хроматографировании значения Y не должны отклоняться от градуировочной прямой более чем на величину доверительной границы случайной составляющей градуировочного графика.

Проведение определения

Пипеткой отбирают 10 куб.см модельной среды, бывшей в непосредственном или опосредованном контакте с образцами, переносят в склянку вместимостью 40 куб.см и плотно завинчивают крышкой с прокладками. Затем склянку помещают в ультратермостат и далее поступают так же, как описано выше для построения калибровочного графика.

Таким же образом проводят анализ контрольной пробы, не бывшей в контакте с образцом, используя для этого чистый шприц. В случае наличия посторонних пиков в контроле опыт повторяют, используя свежеперегнанную модельную среду, до получения стабильных результатов.

Страницы: | Стр. 1 | Стр. 2 | Стр. 3 | Стр. 4 |

Архів документів Папярэдні | Наступны


	Под общей редакцией Валерия Левоневского