Стр. 20
Страницы: | Стр.1 | Стр.2 | Стр.3 | Стр.4 | Стр.5 | Стр.6 | Стр.7 | Стр.8 | Стр.9 | Стр.10 | Стр.11 | Стр.12 | Стр.13 | Стр.14 | Стр.15 | Стр.16 | Стр.17 | Стр.18 | Стр.19 | Стр.20 | Стр.21 | Стр.22 | Стр.23 | Стр.24 | Стр.25 | Стр.26 | Стр.27 | Стр.28 | Стр.29 | Стр.30 | Стр.31 | Стр.32 | Стр.33 | Стр.34 | Стр.35 | Стр.36 | Стр.37 | Стр.38 | Стр.39 | Стр.40 | Стр.41 | Стр.42 | Стр.43 | Стр.44 | Стр.45 | Стр.46 | Стр.47 | Стр.48 | Стр.49 | Стр.50 | Стр.51 |
¦ ¦ ¦ ¦бутылкам); автоклавирование; ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавление дополнительных реагентов;¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦разлив в чашки Петри и их ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦маркировка. Получение суточной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦культуры: выделение изолированной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦колонии, посев ее на соответствующие¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦питательные среды, инкубация ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микробиологического материала в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦термостате с различными газовыми ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦режимами. Приготовление мазка для ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопии: нанесение материала на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предметное стекло, высушивание, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦фиксирование и окраска по ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦определенной методике. Микроскопия: ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦включение светового ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(люминесцентного) микроскопа, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦просмотр препарата с использованием ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦иммерсионного масла, выключение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦прибора и его обработка. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Идентификация с использованием ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стандартных тест-систем и наборов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦биохимических тестов. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Обеззараживание и утилизация ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отработанного биологического ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материала. Обработка полученного ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результата ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.16.2 ¦идентификация урогенитальных¦исследование ¦Исследуемый материал засевают во ¦врач- ¦ 6,5 ¦ - ¦
¦ ¦микоплазм, определение ¦ ¦флакон с транспортной средой. После ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦обсемененности образца и ¦ ¦доставки образца в лабораторию +------------+---------+-----------+
¦ ¦чувствительности к ¦ ¦содержимое флакона в количестве 3 мл¦фельдшер- ¦ 10 ¦ - ¦
¦ ¦антибиотикам с применением ¦ ¦переносят во флакон с лиофильно ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦тест системы Mycoplasma IST ¦ ¦высушенной средой (мочевино- ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦без забора материала в ¦ ¦аргининовый бульон с феноловым ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦лаборатории ¦ ¦красным). Среду взбалтывают до ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦получения однородной взвеси. Затем с¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦помощью микродозатора вносят в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦каждую из 22 лунок стрипа до 55 мкл ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мочевино-аргининового бульона, после¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦чего добавляют во все лунки по 2 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦капли минерального масла. Стрип и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦флакон с мочевино-аргининовым ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦бульоном инкубируют в термостате при¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦37С в течение 48 часов. Изменение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦цвета среды во флаконе и лунках ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стрипа регистрируют через 24 и 48 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦часов. Среда должна оставаться ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦прозрачной. При изменении цвета ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦среды от желтого к красному ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результат исследования оценивают как¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦позитивный. Считывание результатов с¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пластинки должно осуществляться ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦визуально для Ur. urealyticum - ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦через 24 часа, для M. hominis - ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦через 48 часов. Учет результатов ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.16.3 ¦микрометодом с ¦исследование ¦Исследуемый материал засевают во ¦врач- ¦ 5,5 ¦ - ¦
¦ ¦использованием коммерческих ¦ ¦флакон с транспортной средой. После ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦тест-систем: автоматическое ¦ ¦доставки образца в лабораторию +------------+---------+-----------+
¦ ¦считывание (12 тестов) ¦ ¦содержимое флакона в количестве 3 мл¦фельдшер- ¦ 10 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦переносят во флакон с лиофильно ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦высушенной средой (мочевино- ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦аргининовый бульон с феноловым ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦красным). Среду взбалтывают до ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦получения однородной взвеси. Затем с¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦помощью микродозатора вносят в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦каждую из 22 лунок стрипа до 55 мкл ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мочевино-аргининового бульона, после¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦чего добавляют во все лунки по 2 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦капли минерального масла. Стрип и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦флакон с мочевино-аргининовым ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦бульоном инкубируют в термостате при¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦37 град. C в течение 48 часов. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Изменение цвета среды во флаконе и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лунках стрипа регистрируют через 24 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦и 48 часов. Среда должна оставаться ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦прозрачной. При изменении цвета ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦среды от желтого к красному ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результат исследования оценивают как¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦позитивный. Считывание результатов с¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пластинки осуществляется при помощи ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦автоматического регистрирующего ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦устройства для Ur. Urealyticum - ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦через 24 часа, для M. hominis - ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦через 48 часов. Учет результатов ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.16.4 ¦биохимическая идентификация ¦исследование ¦Приготовление питательных сред, ¦врач- ¦ 6,5 ¦ - ¦
¦ ¦одного шт амма ¦ ¦реагентов и диагностикумов: ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦микроорганизма до вида с ¦ ¦подготовка посуды (мойка и +------------+---------+-----------+
¦ ¦использованием ¦ ¦стерилизация); приготовление ¦фельдшер- ¦ 10 ¦ - ¦
¦ ¦автоматизированных систем ¦ ¦питательной среды (добавление ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦навески в дистиллированную воду, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦нагревание и растворение, разлив по ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦бутылкам); автоклавирование; ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавление дополнительных реагентов;¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦разлив в чашки Петри и их ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦маркировка. Получение суточной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦культуры: выделение изолированной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦колонии, посев ее на соответствующие¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦питательные среды, инкубация ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микробиологического материала в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦термостате с различными газовыми ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦режимами. Приготовление мазка для ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопии: нанесение материала на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предметное стекло, высушивание, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦фиксирование и окраска по ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦определенной методике. Микроскопия: ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦включение светового ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(люминесцентного) микроскопа, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦просмотр препарата с использованием ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦иммерсионного масла, выключение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦прибора и его обработка. Получение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микробиологической взвеси культуры, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ее стандартизация в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦идентификационном бульоне с помощью ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦нефелометра, заполнение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦идентификационной панели, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦регистрация и помещение панели в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦прибор, инкубация и просмотр ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результатов Выгрузка панели с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦биологическим материалом из прибора,¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ее обеззараживание и утилизация. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Обработка полученного результата с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦использованием компьютерной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦программы, распечатывание ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результатов на принтере. Техническое¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦обслуживание используемой аппаратуры¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17 ¦отдельные виды исследований ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦и работ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.1 ¦вирусологические ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦исследования в культуре ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦клеток ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.1.1 ¦с отсутствием ¦исследование ¦Приготовление питательных сред, ¦врач- ¦ 207,5 ¦ - ¦
¦ ¦цитопатического действия ¦ ¦смеси трипсина и версена. ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Инактивация эмбриональной телячьей +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦сыворотки (ЭТС). Аликвотирование ¦фельдшер- ¦ 182,5 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦ЭТС, L-глутамина, антибиотиков, ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦витаминных ростовых добавок и смеси ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦трипсина с версеном. Поддержание ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦клеточных культур: удаление жидкой ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦среды из флакона с клеточным ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦монослоем, отмывание клеток, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отделение их от стенок флакона, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ресуспендирование в приготовленной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦питательной среде, подсчет ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦концентрации клеток в камере ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Горяева, рассеивание в культуральном¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦планшете или флаконе, контроль ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦формирования монослоя. Инокуляция ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦поступившего биоматериала на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦клеточную культуру: удаление ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ростовой среды из планшета, либо ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦флакона, с клеточным монослоем, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отмывание клеток, внесение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦биоматериала, термостатирование ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(либо центрифугирование) ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦культуральных планшетов или флаконов¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦при температуре 37 град. C, удаление¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инокулята и добавление свежей ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦поддерживающей питательной среды. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Размещение планшетов либо флаконов с¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инфицированной культурой в СО2- ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инкубаторе (при 37 град. C) и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦наблюдение за монослоем в течение 5 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦- 7 дней. Проведение исследований на¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦наличие вирусных антигенов методом ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦РИФ в ходе наблюдения за ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инфицированным клеточным монослоем. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Проведение слепого пассажа ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(повторной инокуляции предварительно¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отделенного инфицированного ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦клеточного монослоя). ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Обеззараживание и утилизация ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦планшетов либо флаконов с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦биоматериалом. Обработка результата ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.1.2 ¦с наличием цитопатического ¦исследование ¦Приготовление питательных сред, ¦врач- ¦ 265 ¦ - ¦
¦ ¦действия и идентификацией ¦ ¦смеси трипсина и версена. ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦вирусов ¦ ¦Инактивация эмбриональной телячьей +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦сыворотки (ЭТС). Аликвотирование ¦фельдшер- ¦ 255 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦ЭТС, L-глутамина, антибиотиков, ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦витаминных ростовых добавок и смеси ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦трипсина с версеном. Поддержание ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦клеточных культур: удаление жидкой ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦среды из флакона с клеточным ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦монослоем, отмывание клеток, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отделение их от стенок флакона, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ресуспендирование в приготовленной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦питательной среде, подсчет ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦концентрации клеток в камере ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Горяева, рассеивание в культуральном¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦планшете или флаконе, контроль ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦формирования монослоя. Инокуляция ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦поступившего биоматериала на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦клеточную культуру: удаление ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ростовой среды из планшета, либо ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦флакона, с клеточным монослоем, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отмывание клеток, внесение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦биоматериала, термостатирование ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(либо центрифугирование) ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦культуральных планшетов или флаконов¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦при температуре 37 град. C, удаление¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инокулята и добавление свежей ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦поддерживающей питательной среды. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Размещение планшетов либо флаконов с¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инфицированной культурой в СО2- ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инкубаторе (при 37 град. C) и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦наблюдение за монослоем в течение 5 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦- 7 дней. Определение ранних ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вирусных антигенов методом РИФ в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ходе наблюдения за инфицированным ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦клеточным монослоем. Проведение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пассажа (повторной инокуляции ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предварительно отделенного ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инфицированного клеточного монослоя)¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦для подтверждения ЦПД. Визуальная ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦оценка по характеру ЦПД ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предполагаемой принадлежности ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вирусного агента. Идентификация ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вируса путем проведения РИФ, реакции¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦нейтрализации. Обеззараживание и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦утилизация планшетов либо флаконов с¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦биоматериалом. Обработка результата ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.2 ¦латекс-агглютинация ¦исследование ¦Нанесение биоматериала на стекло при¦врач- ¦ 4 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦помощи микропипетки либо дозатора с ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦последующим добавлением латексных +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦частиц, сорбированных антигеном. ¦фельдшер- ¦ 1 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦Размешивание смеси циркулярным ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦покачиванием. Учет результата. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Дезинфекция использованных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вспомогательных материалов и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предметного стекла ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.3 ¦реакция непрямой ¦исследование ¦Подготовка титровальной пластины. ¦врач- ¦ 8 ¦ - ¦
¦ ¦агглютинации с одним ¦ ¦Разведение содержимого ампул ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦антигеном ¦ ¦диагностикума. Приготовление в +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦титровальном планшете ¦фельдшер- ¦ 17 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦последовательных разведений ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦биологического материала. Внесение в¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лунки с разведенным биологическим ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материалом разведенного содержимого ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ампул диагностикума. Инкубация при ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦комнатной температуре либо в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦термостате при 37 град. C. Учет ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результата. Дезинфекция ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦использованных вспомогательных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материалов и титровальной пластины ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.4 ¦реакция пассивной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦гемагглютинации с одним ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦диагностикумом (РПГА) ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.4.1 ¦качественный метод ¦исследование ¦РПГА-тест выявляет в сыворотке крови¦врач- ¦ 10 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦специфические антитела. Исследуемую ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦сыворотку разводят в 20 раз буфером +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦и вносят в две лунки микропланшета. ¦фельдшер- ¦ 10 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦В 1-ую лунку добавляют 1 каплю (75 ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мкл) суспензии тест-эритроцитов, во ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦2-ую - 1 каплю (75 мкл) контрольных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦эритроцитов. Параллельно ставят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦положительный и отрицательный ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контроль с суспензией тест- ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦эритроцитов. Содержимое лунок ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦перемешивают. После инкубации при ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦комнатной температуре учитывают ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результаты агглютинации. Оценка ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результатов осуществляется по ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦четырехбальной системе ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.4.2 ¦количественный метод ¦исследование ¦Сыворотка с положительной РПГА ¦врач- ¦ 4 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦титруется двухкратным шагом, ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦параллельно титруется положительный +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦контроль. В лунку начального ¦фельдшер- ¦ 15,5 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦разведения вносят контрольные ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦эритроциты, в лунки последующих ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦разведений - тест-эритроциты. После ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦перемешивания и инкубации проводят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦учет каждого разведения и определяют¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦титр антител ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.5 ¦реакция связывания ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦комплемента при диагностике ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦сифилиса ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.5.1 ¦единичное исследование ¦исследование ¦Разведенная изотоническим раствором ¦врач- ¦ 50 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦в 5 раз сыворотка крови вносится в 3¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирки. В первую пробирку вносят +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦разведенный по титру кардиолипиновый¦фельдшер- ¦ 100 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦антиген для РСК, во вторую - ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦разведенный по титру трепонемный ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦антиген, третья пробирка - ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контрольная и во все пробирки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦оттитрованный и разведенный по ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦рабочей дозе комплемент. После ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инкубации при 37 град. C для ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выявления комплекса антиген + ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦антитело во все пробирки вносят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦гемолитическую систему ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(гемолитическая сыворотка + 3% ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦взвесь эритроцитов барана). Учет ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результатов проводится визуально ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦после наступления гемолиза в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контрольной пробирке и оценивается в¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦баллах от 1 до 4 ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.5.2 ¦одно исследование в серии из¦исследование ¦Разведенная изотоническим раствором ¦врач- ¦ 7 ¦ - ¦
¦ ¦10 ¦ ¦в 5 раз сыворотка крови вносится в 3¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирки. В первую пробирку вносят +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦разведенный по титру кардиолипиновый¦фельдшер- ¦ 15 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦антиген для РСК, во вторую - ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦разведенный по титру трепонемный ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦антиген, третья пробирка - ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контрольная и во все пробирки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦оттитрованный и разведенный по ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦рабочей дозе комплемент. После ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инкубации при 37 град. C для ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выявления комплекса антиген + ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦антитело во все пробирки вносят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦гемолитическую систему ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(гемолитическая сыворотка +3% взвесь¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦эритроцитов барана). Учет ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результатов проводится визуально ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦после наступления гемолиза в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контрольной пробирке и оценивается в¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦баллах от 1 до 4 ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.5.3 ¦количественный метод реакции¦исследование ¦Положительная сыворотка титруется в ¦врач- ¦ 17 ¦ - ¦
¦ ¦связывания комплемента ¦ ¦трех рядах от 1:5 до 1:640 после ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦(реакция Вассермана) с ¦ ¦чего в 1 ряд вносят разведенный по +------------+---------+-----------+
¦ ¦кардиолипиновым и ¦ ¦титру кардиолипиновый антиген, во 2 ¦фельдшер- ¦ 19 ¦ - ¦
¦ ¦трепонемным антигенами ¦ ¦- разведенный по титру трепонемный ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦антиген (3 ряд контрольный с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦физраствором) и во все ряды - ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦комплемент, разведенный по рабочей ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦дозе. После термостатирования во все¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ряды вносят гемолитическую систему. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦После повторного термостатирования ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦учет результатов каждого разведения ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦проводят визуально при наступлении ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦гемолиза в контрольной пробирке ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.6 ¦реакция иммунофлюоресценции ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.6.1 ¦единичное исследование ¦исследование ¦Приготовление мазка на стекле, ¦врач- ¦ 27,5 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦фиксация ацетоном. Нанесение ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦специфических антител, меченных +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦ФИТЦ, инкубация, отмывание ¦фельдшер- ¦ 32,5 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦несвязавшегося материала, ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦подсушивание мазка. Включение и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦настройка люминесцентного микроскопа¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦с последующей визуализацией ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопируемого препарата. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Отключение и дезобработка микроскопа¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Дезинфекция использованных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вспомогательных материалов и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предметного стекла ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.6.2 ¦одно исследование в серии из¦исследование ¦Приготовление мазков на стекле, ¦врач- ¦ 17,5 ¦ - ¦
¦ ¦10 ¦ ¦фиксация ацетоном. Нанесение ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦специфических антител, меченных +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦ФИТЦ, инкубация, отмывание ¦фельдшер- ¦ 6 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦несвязавшегося материала, ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦подсушивание мазка. Включение и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦настройка люминесцентного микроскопа¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦с последующей визуализацией ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопируемых препаратов. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Отключение и дезобработка микроскопа¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Дезинфекция использованных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вспомогательных материалов и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предметных стекол ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.7 ¦реакция непрямой ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦иммунофлюоресценции ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.7.1 ¦единичное исследование ¦исследование ¦Приготовление мазка на стекле, ¦врач- ¦ 20 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦фиксация ацетоном. Нанесение ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦специфических антител, инкубация, +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦отмывание несвязавшегося материала. ¦фельдшер- ¦ 70 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦Нанесение меченных ФИТЦ антитвидовых¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦антител, инкубация, отмывание ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦несвязавшегося материала, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦подсушивание мазка. Включение и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦настройка люминесцентного микроскопа¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦с последующей визуализацией ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопируемого препарата. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Отключение и дезобработка микроскопа¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Дезинфекция использованных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вспомогательных материалов и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предметного стекла ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.7.2 ¦одно исследование в серии из¦исследование ¦Приготовление мазков на стекле, ¦врач- ¦ 29,5 ¦ - ¦
¦ ¦10 ¦ ¦фиксация ацетоном. Нанесение ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦специфических антител, инкубация, +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦отмывание несвязавшегося материала. ¦фельдшер- ¦ 8 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦Нанесение меченных ФИТЦ антивидовых ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦антител, инкубация, отмываение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦несвязавшегося материала, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦подсушивание мазков. Включение и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦настройка люминесцентного микроскопа¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦с последующей визуализацией ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопируемых препаратов. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Отключение и дезобработка микроскопа¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Дезинфекция использованных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вспомогательных материалов и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предметных стекол ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.7.3 ¦реакция непрямой ¦исследование ¦На обезжиренные предметные стекла (в¦врач- ¦ 23 ¦ - ¦
¦ ¦иммунофлюоресценции РИФ-200 ¦ ¦2 лунки) наносится антиген (взвесь ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦и реакция ¦ ¦бледных трепонем), препарат +------------+---------+-----------+
¦ ¦иммунофлюоресценции с ¦ ¦высушивается, фиксируется в ацетоне.¦фельдшер- ¦ 16 ¦ - ¦
¦ ¦адсорбцией - качественный ¦ ¦Испытуемая сыворотка разводится в ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦метод ¦ ¦200 раз фосфатным буфером и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦наносится на антиген в 1-ую лунку ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стекла, на антиген во 2-ую лунку ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦наносится сыворотка, разведенная в 5¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦раз сорбентом (оттитрованным и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦разведенным по титру). Инкубация в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦термостате (во влажной камере). ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Промывка стекла в 2 порциях буфера. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Растворение, титрование и разведение¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦по титру иммуноглобулинов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦антивидовых флюоресцирующих для РИФ-¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦200 и РИФ-abs, нанесение их в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦соответствующие лунки стекла. После ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инкубации, промывки стекол, сушки - ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦нанесение нефлюоресцирующей ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦иммерсионной жидкости. Учет ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результатов двух реакций в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦люминесцентном микроскопе, оценка их¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦по четырехбальной системе ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.7.4 ¦реакция непрямой ¦исследование ¦Положительная сыворотка титруется ¦врач- ¦ 42 ¦ - ¦
¦ ¦иммунофлюоресценции РИФ-200 ¦ ¦буфером от 1:400 до 1:51200. Все ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦-количественный метод ¦ ¦разведения наносятся на стекла с +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦антигеном (8 препаратов). Далее ¦фельдшер- ¦ 34,5 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦постановка реакции по схеме ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦качественной РИФ. Оценка результатов¦ ¦ ¦ ¦
Страницы: | Стр.1 | Стр.2 | Стр.3 | Стр.4 | Стр.5 | Стр.6 | Стр.7 | Стр.8 | Стр.9 | Стр.10 | Стр.11 | Стр.12 | Стр.13 | Стр.14 | Стр.15 | Стр.16 | Стр.17 | Стр.18 | Стр.19 | Стр.20 | Стр.21 | Стр.22 | Стр.23 | Стр.24 | Стр.25 | Стр.26 | Стр.27 | Стр.28 | Стр.29 | Стр.30 | Стр.31 | Стр.32 | Стр.33 | Стр.34 | Стр.35 | Стр.36 | Стр.37 | Стр.38 | Стр.39 | Стр.40 | Стр.41 | Стр.42 | Стр.43 | Стр.44 | Стр.45 | Стр.46 | Стр.47 | Стр.48 | Стр.49 | Стр.50 | Стр.51 |
| 
