Стр. 9
Страницы: | Стр.1 | Стр.2 | Стр.3 | Стр.4 | Стр.5 | Стр.6 | Стр.7 | Стр.8 | Стр.9 | Стр.10 | Стр.11 | Стр.12 | Стр.13 | Стр.14 | Стр.15 | Стр.16 | Стр.17 | Стр.18 | Стр.19 | Стр.20 | Стр.21 | Стр.22 | Стр.23 | Стр.24 | Стр.25 | Стр.26 | Стр.27 | Стр.28 | Стр.29 | Стр.30 | Стр.31 | Стр.32 | Стр.33 | Стр.34 | Стр.35 | Стр.36 | Стр.37 | Стр.38 | Стр.39 | Стр.40 | Стр.41 | Стр.42 | Стр.43 | Стр.44 | Стр.45 | Стр.46 | Стр.47 | Стр.48 | Стр.49 | Стр.50 | Стр.51 |
¦ ¦ ¦ ¦Избыток АТ или АГ не образовавшихся ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦комплексов удаляют. Во все ячейки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вносят отмывающий буфер, затем его ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦удаляют. Процедуру отмывки проводят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦4 - 5 кратно вручную или с помощью ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отмывающего устройства. Готовят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦конъюгат. Затем вносят во все ячейки¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦конъюгат, меченый ферментом АГ или ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦АТ. Инкубируют в термостатируемом ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦плашечном шейкере 30 - 60 мин, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦проводят 4-х кратное отмывание ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦планшета или пробирок. Готовят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦субстрат для ферметативной реакции. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Инкубируют в темноте 20 - 30 мин. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Останавливают реакцию добавлением ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стоп-реагента. Проводят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦спектрофотометрическое определение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦абсорбции. Построение калибровочной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦кривой и учет результатов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Дезинфекция образцов, планшета, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦рабочего стола, инструментария, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦приборов, посуды ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.9.4.2 ¦автоматизированный расчет ¦исследование ¦Включение прибора и проведение ¦врач- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦процедуры ежедневного обслуживания. ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Приготовление промывающего раствора.+------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦Введение в память прибора номера ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦
¦ ¦ ¦ ¦образца, ФИО пациента, название ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦теста. Распечатка листа загрузки. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Загрузка образца, реагентов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(коньюгат, проявитель, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦останавливающий раствор, антиген, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦промывающий раствор). Старт прибора.¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦По окончании работы прибора ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦распечатка результатов анализа. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Проведение процедуры ежедневного ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦обслуживания прибора ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.10 ¦определение общего ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦иммуноглобулина Е методом ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦иммуноферметного анализа ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.10.1 ¦полуавтоматизированный ¦исследование ¦Отбор образцов и стандартов и ¦врач- ¦ - ¦ 3 ¦
¦ ¦расчет ¦ ¦внесение их в пробирки или лунки ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦планшета, на которых предварительно +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦проводят процедуру фиксации, ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦
¦ ¦ ¦ ¦отмывки, закрепления АТ (антитело) ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦или АГ (антиген). (На готовых тест- ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦системах АГ или АТ заранее ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦фиксированы в лунках). Инкубация 30 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦- 60 мин (и более) в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦термостатируемом плашечном шейкере. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Избыток АТ или АГ не образовавшихся ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦комплексов удаляют. Во все ячейки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вносят отмывающий буфер, затем его ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦удаляют. Процедуру отмывки проводят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦4 - 5 кратно вручную или с помощью ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отмывающего устройства. Готовят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦конъюгат. Затем вносят во все ячейки¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦конъюгат, меченый ферментом АГ или ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦АТ. Инкубация в термостатируемом ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦плашечном шейкере 30 - 60 мин. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Конъюгат удаляют и проводят 4-х ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦кратное отмывание планшета или ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирок. Перед внесением готовят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦субстрат для ферметативной реакции. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Добавляют субстрат во все лунки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦планшета. Инкубация в темноте 20 - ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦30 мин. Останавливают реакцию ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавлением стоп-реагента и проводят¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦спектрофотометрическое определение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦концентрации продукта ферментативной¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦реакции. Построение калибровочной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦кривой и учет результатов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Дезинфекция образцов, планшета, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦рабочего стола, инструментария, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦приборов, посуды ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.10.2 ¦автоматизированный расчет ¦исследование ¦Включение прибора и проведение ¦врач- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦процедуры ежедневного обслуживания. ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Приготовление промывающего раствора.¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Введение в память прибора номера ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦образца, ФИО пациента, название ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦теста. Распечатка листа загрузки. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Загрузка образца, реагентов +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦(коньюгат, проявитель, ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦
¦ ¦ ¦ ¦останавливающий раствор, антиген, ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦промывающий раствор). Старт прибора.¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦По окончании работы прибора ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦распечатка результатов анализа. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Проведение процедуры ежедневного ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦обслуживания прибора ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.11 ¦определение специфического ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦иммуноглобулина Е ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.11.1 ¦методом иммуноферментного ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦анализа ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.11.1.1 ¦полуавтоматизированный ¦исследование ¦Подготовка образцов и внесение ¦врач- ¦ - ¦ 3 ¦
¦ ¦расчет ¦ ¦стандартов в пробирки или планшеты, ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦на которых фиксируют АТ (антитело) +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦или АГ (антиген). В дисковых тест- ¦фельдшер- ¦ - ¦ 7 ¦
¦ ¦ ¦ ¦системах в ячейки раскладыват ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦аллергодиски, HSA - контрольные ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦диски, диски для стандартов, для ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦позитивного и негативного контролей.¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Время инкубации 30 - 60 мин. в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦термостатируемом плашечном шейкере. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Избыток АТ или АГ не образовавшихся ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦комплексов удаляют. Отмывочным ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦буфером 4 - 5 кратно отмывают ячейки¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦планшета (в дисковых тест-системах -¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦до 9 раз специальным вошером до 1,0 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мл за 1 цикл отмывки). Затем вносят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦конъюгат АГ или АТ, меченый ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ферментом. Инкубация на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦термостатируемом шейкере 30 - 60 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мин. Удаление конъюгата и 4-х ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦кратное отмывание планшета или ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирок. Добавление субстрата во ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦все лунки планшета. Инкубация 20 - ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦30 минут. Остановка реакции ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавлением стоп-реагента. Измерение¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦концентрации продуктов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ферментативной реакции. Построение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦калибровочной кривой Дезинфекция ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦образцов, планшета, рабочего стола, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инструментария, приборов, посуды ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.11.1.2 ¦автоматизированный расчет ¦исследование ¦Включение прибора и проведение ¦врач- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦процедуры ежедневного обслуживания. ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Приготовление промывающего раствора.+------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦Введение в память прибора номера ¦фельдшер- ¦ - ¦ 7 ¦
¦ ¦ ¦ ¦образца, ФИО пациента, название ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦теста. Распечатка листа загрузки. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Загрузка образца, реагентов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(коньюгат, проявитель, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦останавливающий раствор, антиген, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦промывающий раствор). Старт прибора.¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦По окончании работы прибора ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦распечатка результатов анализа. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Проведение процедуры ежедневного ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦обслуживания прибора ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.12 ¦определение секреторных ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦иммуноглобулинов ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.12.1 ¦методом радиальной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦иммунодиффузии ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.12.1.1 ¦с приготовлением и заливкой ¦исследование ¦Растворяют 1,5 г агара в 100 мл ¦врач- ¦ - ¦ 6 ¦
¦ ¦агара, построением ¦ ¦буфера на водяной бане, охлаждают до¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦калибровочной кривой ¦ ¦48 град. C и смешивают с АС, +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦подогретой до той же температуры. ¦фельдшер- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦Наносят пипеткой 2 мл смеси на ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предметное стекло, установленное ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦строго горизонтально на подставке, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦нагретой до 35 - 40 град. C. Золь ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦агара, содержащий АТ, распределяется¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦по поверхности предметного стекла и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦застывает слоем толщиной 1 мм. На ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предметном стекле в слое геля ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вырезают по 8 лунок (и более) при ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦помощи отшлифованной стеклянной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦трубки, соединенной с водоструйным ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦насосом. В каждую из лунок вносят по¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦2 мкл раствора антигена (стандартов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦и образцов). Реакцию простой ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦радиальной ИД проводят во влажной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦камере 24 - 48 часов. Препараты ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦высушивают и окрашивают. К моменту ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦завершения диффузии наблюдается ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦прямая линейная зависимость между ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦исходной концентрацией АГ и площадью¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦преципитата. Построение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦калибровочной кривой и проведение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦расчетов концентраций проб. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Дезинфекция проб и рабочего места ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.12.1.2 ¦с использованием готовых ¦исследование ¦В готовые планшеты с лунками ¦врач- ¦ - ¦ 6 ¦
¦ ¦иммунодиффузионных планшет ¦ ¦добавляют образцы, предварительно ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦разведенные. Планшеты помещают во +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦влажную камеру. Инкубируют, ¦фельдшер- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦высушивают и окрашивают. Для ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦построения графика берут логарифм ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦концентрации АГ и как функцию от ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦него площадь преципитата, квадрат ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦диаметра зоны преципитации или ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦логарифм диаметра преципитата. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Проводят количественную оценку ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦преципитата ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.12.2 ¦методом иммуноферментного ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦анализа ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.12.2.1 ¦полуавтоматизированный ¦исследование ¦Внесение образцов и стандартов x в ¦врач- ¦ - ¦ 3 ¦
¦ ¦расчет ¦ ¦пробирки или лунки планшета, на ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦которых предварительно проводят +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦процедуру фиксации, отмывки, ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦
¦ ¦ ¦ ¦закрепления АТ (антитело) или АГ ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(антиген). (На готовых тест-системах¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦АГ или АТ заранее фиксированы в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лунках). Инкубация 30 - 60 мин (и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦более) в термостатируемом плашечном ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦шейкере. Избыток АТ или АГ не ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦образовавшихся комплексов удаляют. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Во все ячейки вносят отмывающий ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦буфер, затем удаляют его. Процедуру ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отмывки проводят 4 - 5 кратно ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вручную или с помощью отмывающего ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦устройства. Готовят конъюгат. Затем ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вносят во все ячейки конъюгат, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦меченый ферментом АГ или АТ. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Инкубация в термостатируемом ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦плашечном шейкере 30 - 60 мин. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Удаляют конъюгат, проводят 4-х ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦кратное отмывание планшета или ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирок. Добавляют субстрат во все ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лунки планшета. Инкубация в темноте ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦20 - 30 мин. Остановка реакции ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавлением стоп-реагента. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Спектрофотометрическое определение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦абсорбции. Построение калибровочной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦кривой и учет результатов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Дезинфекция образцов, планшета, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦рабочего стола, инструментария, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦приборов, посуды ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.12.2.2 ¦автоматизированный расчет ¦исследование ¦Включение прибора и проведение ¦врач- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦процедуры ежедневного обслуживания. ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Приготовление промывающего раствора.+------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦Введение в память прибора номера ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦
¦ ¦ ¦ ¦образца, ФИО пациента, название ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦теста. Распечатка листа загрузки. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Загрузка образца, реагентов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(коньюгат, проявитель, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦останавливающий раствор, антиген, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦промывающий раствор). Старт прибора.¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦По окончании работы прибора ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦распечатка результатов анализа. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Проведение процедуры ежедневного ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦обслуживания прибора ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.13 ¦определение циркулирующих ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦иммунных комплексов (с ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦выделением и типированием) ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.13.1 ¦методом радиальной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦иммунодиффузии ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.13.1.1 ¦с приготовлением и заливкой ¦исследование ¦Растворяют 1,5 г агара в 100 мл ¦врач- ¦ - ¦ 3 ¦
¦ ¦агара, построением ¦ ¦буфера на водяной бане, охлаждают до¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦калибровочной кривой ¦ ¦48 град. C и смешивают с АС, +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦подогретой до той же температуры, в ¦фельдшер- ¦ - ¦ 7 ¦
¦ ¦ ¦ ¦соответствии с инструкцией. Наносят ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пипеткой 2 мл смеси на предметное ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стекло, установленное строго ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦горизонтально на подставке, нагретой¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦до 35 - 40 град. C. Золь агара, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦содержащий АТ, распределяется по ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦поверхности предметного стекла и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦застывает слоем толщиной 1 мм. На ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предметном стекле в слое геля ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вырезают по 8 лунок при помощи ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отшлифованной стеклянной трубки, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦соединенной с водоструйным насосом. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦В каждую из лунок вносят по 2 мкл ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦раствора антигена. Реакцию простой ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦радиальной ИД проводят во влажной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦камере. Препараты высушивают и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦окрашивают. К моменту завершения ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦диффузии наблюдается прямая линейная¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦зависимость между исходной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦концентрацией АГ и площадью ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦преципитата. Построение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦калибровочной кривой ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.13.1.2 ¦с использованием готовых ¦исследование ¦Внесение в лунки планшета ¦врач- ¦ - ¦ 3 ¦
¦ ¦иммунодиффузионных планшет ¦ ¦физраствора, раствора ПЭГ, сыворотки¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦крови. Инкубация при комнатной +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦температуре. Учет результата на ¦фельдшер- ¦ - ¦ 7 ¦
¦ ¦ ¦ ¦спектрофотометре. Расчет ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦окончательного результата ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.13.2 ¦методом иммуноферментного ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦анализа ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.13.2.1 ¦полуавтоматизированный ¦исследование ¦Образцы добавляют в пробирки или ¦врач- ¦ - ¦ 3 ¦
¦ ¦расчет ¦ ¦планшеты на которых фиксируют АТ ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(антитело) или АГ (антиген). Время +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦инкубации 30 - 60 мин. Избыток не ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦
¦ ¦ ¦ ¦образовавшихся комплексов удаляют 4 ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦- 5 кратным отмыванием. Затем вносят¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦меченый ферментом АГ или АТ. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Инкубация 30 - 60 мин. 4-х кратное ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отмывание планшета или пробирок. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Добавляют субстрат для фермента, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦останавливают реакцию по истечении ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦определенного времени и проводят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦колориметрическое определение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦продуктов ферментативной реакции. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Построение калибровочной кривой ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.13.2.2 ¦автоматизированный расчет ¦исследование ¦Образцы добавляют в пробирки или ¦врач- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦планшеты на которых фиксируют АТ ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(антитело) или АГ (антиген). Время +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦инкубации 30 - 60 мин. Избыток не ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦
¦ ¦ ¦ ¦образовавшихся комплексов удаляют 4 ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦- 5 кратным отмыванием. Затем вносят¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦меченый ферментом АГ или АТ. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Инкубация 30 - 60 мин. 4-х кратное ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отмывание планшета или пробирок. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Добавляют субстрат для фермента, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦останавливают реакцию по истечении ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦определенного времени и проводят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦колориметрическое определение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦продуктов ферментативной реакции ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.14 ¦определение фагоцитарной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦активности лейкоцитов ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.14.1 ¦латекс-тестом ¦исследование ¦Внесение в лунку планшета ¦врач- ¦ - ¦ 6 ¦
¦ ¦ ¦ ¦лейкоцитарной взвеси, добавление ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦взвеси частиц латекса, +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦перемешивание, инкубация в ¦фельдшер- ¦ - ¦ 3 ¦
¦ ¦ ¦ ¦термостате. Центрифугирование. ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Удаление надосадочной жидкости, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавление дистиллированной воды, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦перемешивание. Приготовление ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦препарата на предметном стекле. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Высушивание, фиксация, промывание, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦окрашивание препарата. Учет ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результата под иммерсионной системой¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопа ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.14.2 ¦тестом с нитросиним ¦исследование ¦В две агглютинационные пробирки ¦врач- ¦ - ¦ 11 ¦
¦ ¦тетразолием ¦ ¦вносят по 0,05 мл капиллярной крови,¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦затем в одну из них добавляют 0,025 +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦мл изотонического фосфатного буфера,¦фельдшер- ¦ - ¦ 16 ¦
¦ ¦ ¦ ¦в другую - 0,025 мл суспензии ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦зимозана. После этого в пробирки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вносят по 0,025 мл 0,15%-ного ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦раствора НСТ. Содержимое пробирок ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦осторожно перемешивают и инкубируют ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦на водяной бане при температуре 37 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦град. C 30 мин, перемешивая каждые ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦10 мин. После инкубации, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦перемешивают, наносят по одной капле¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦на предметные стекла, делают мазки и¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦высушивают на воздухе. Готовые мазки¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦фиксируют метанолом 10 мин, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦высушивают, докрашивают 2%-ным ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦водным раствором метилового зеленого¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦20 мин, промывают, высушивают и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопируют ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.14.3 ¦прямым визуальным методом ¦исследование ¦Приготовление взвеси пекарских ¦врач- ¦ - ¦ 44 ¦
¦ ¦определения фагоцитоза ¦ ¦дрожжей в физиологическом растворе. ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Кипятят на водяной бане в течение +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦часа. Отмывают физиологическим ¦фельдшер- ¦ - ¦ 28 ¦
¦ ¦ ¦ ¦раствором, центрифугируют. Из осадка¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦готовят рабочий раствор взвеси. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Внесение в лунку планшета ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лейкоцитарной взвеси, добавление ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦взвеси пекарских дрожжей, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦перемешивание, инкубация в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦термостате. Центрифугирование. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Удаление надосадочной жидкости, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавление дистиллированной воды, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦перемешивание. Приготовление ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦препарата на предметном стекле. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Высушивание, фиксация, промывание, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦окрашивание препарата. Учет ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результата под иммерсионной системой¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопа Дезинфекция образцов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦биоматериала, посуды, рабочего места¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.14.4 ¦спектрофотометрическим ¦исследование ¦Выделение нейтрофилов в градиенте ¦врач- ¦ - ¦ 3 ¦
¦ ¦методом ¦ ¦плотности. Подсчет нейтрофилов в ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦камере Горяева. Внесение в лунку +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦планшета нейтрофильной взвеси и ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦
¦ ¦ ¦ ¦диагностикума. Инкубация 30 - 60 ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мин. Добавление реагента ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦останавливающего реакцию. Измерение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦продукции реакции ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.14.5 ¦лизосомально-катионным ¦исследование ¦Подготовка реагентов для постановки ¦врач- ¦ - ¦ 11 ¦
¦ ¦тестом ¦ ¦исследования. Приготовление ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦препарата на предметном стекле. +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦Высушивание. Проведение процедуры ¦фельдшер- ¦ - ¦ 16 ¦
¦ ¦ ¦ ¦фиксации, окраска препарата. Учет ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результата под иммерсионной системой¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопа Расчет среднего ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦цитохимического коэффициента (СЦК) ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.15 ¦определение комплементарной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦активности сыворотки крови ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.15.1 ¦методом титрования по 50%-му¦исследование ¦Приготовление гемсистемы. Маркировка¦врач- ¦ - ¦ 15 ¦
¦ ¦гемолизу ¦ ¦и расстановка пробирок, разливка ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦буфера и внесение исследуемых ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦сывороток. Титрование исследуемых ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦сывороток в ряду пробирок (10 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирок). Добавление гемолитической¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦системы во все ряды. Инкубация в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦термостате 45 мин. Встряхивание ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦каждые 15 мин. Помещают пробы в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦холодильник на 10 мин. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Центрифугирование. Визуальный учет ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результатов Дезинфекция посуды и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦проб, рабочего места, приборов ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.15.2 ¦турбидиметрическим методом ¦исследование ¦В пробирке смешивают сыворотку и ¦врач- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦реактив 1, тщательно перемешивают ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стеклянной палочкой. Инкубируют 10 +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦мин при комнатной температуре. ¦фельдшер- ¦ ¦ 2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦Центрифугируют 15 мин. Отбирают ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦центрифугат, и к нему добавляют ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦реактив 2. Инкубируют 15 мин. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Измеряют оптическую плотность на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦фотоэлектроколориметре. Результаты ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦сравнивают с результатом контрольной¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробы. Разница их значений отражает ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦концентрацию определяемого вещества ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.16 ¦определение индивидуальных ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦белков сыворотки крови (СРБ,¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦С3, С4, С5, С1-ингибитор ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦и т.д.) ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.16.1 ¦методом радиальной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦иммунодиффузии (РИД) ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.16.1.1 ¦с приготовлением и заливкой ¦исследование ¦Растворяют 1,5 г агара в 100 мл ¦врач- ¦ - ¦ 6 ¦
¦ ¦агара, построением ¦ ¦буфера на водяной бане, охлаждают до¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦калибровочной кривой ¦ ¦48 град. C и смешивают с АС, +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦подогретой до той же температуры, в ¦фельдшер- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦соответствии с инструкцией. Наносят ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пипеткой 2 мл смеси на предметное ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стекло, установленное строго ¦ ¦ ¦ ¦
Страницы: | Стр.1 | Стр.2 | Стр.3 | Стр.4 | Стр.5 | Стр.6 | Стр.7 | Стр.8 | Стр.9 | Стр.10 | Стр.11 | Стр.12 | Стр.13 | Стр.14 | Стр.15 | Стр.16 | Стр.17 | Стр.18 | Стр.19 | Стр.20 | Стр.21 | Стр.22 | Стр.23 | Стр.24 | Стр.25 | Стр.26 | Стр.27 | Стр.28 | Стр.29 | Стр.30 | Стр.31 | Стр.32 | Стр.33 | Стр.34 | Стр.35 | Стр.36 | Стр.37 | Стр.38 | Стр.39 | Стр.40 | Стр.41 | Стр.42 | Стр.43 | Стр.44 | Стр.45 | Стр.46 | Стр.47 | Стр.48 | Стр.49 | Стр.50 | Стр.51 |
| 
