Стр. 8
Страницы: | Стр.1 | Стр.2 | Стр.3 | Стр.4 | Стр.5 | Стр.6 | Стр.7 | Стр.8 | Стр.9 | Стр.10 | Стр.11 | Стр.12 | Стр.13 | Стр.14 | Стр.15 | Стр.16 | Стр.17 | Стр.18 | Стр.19 | Стр.20 | Стр.21 | Стр.22 | Стр.23 | Стр.24 | Стр.25 | Стр.26 | Стр.27 | Стр.28 | Стр.29 | Стр.30 | Стр.31 | Стр.32 | Стр.33 | Стр.34 | Стр.35 | Стр.36 | Стр.37 | Стр.38 | Стр.39 | Стр.40 | Стр.41 | Стр.42 | Стр.43 | Стр.44 | Стр.45 | Стр.46 | Стр.47 | Стр.48 | Стр.49 | Стр.50 | Стр.51 |
¦ ¦ ¦ ¦перед проведением выбранного теста. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Установка рабочего барабана, ротора,¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦кювет с рабочими реагентами. Запуск ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выбранной программы. Распечатка ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результатов ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦6.39 ¦определение Д-димеров на ¦исследование ¦Подготовка контрольных материалов и ¦врач- ¦ 25 ¦ 25 ¦
¦ ¦автоматическом коагулометре ¦ ¦разведение рабочих реагентов. ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Задание программы на анализаторе. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Калибровка прибора непосредственно ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦перед проведением исследования. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Установка рабочего барабана, ротора,¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦кювет с рабочими реагентами. Запуск ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выбранной программы. Распечатка ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результатов ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦6.40 ¦исследование параметров ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦коагулограммы на ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦автоматических коагулометрах¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦6.40.1 ¦определение активированного ¦исследование ¦Подготовка контрольных материалов и ¦врач- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦частичного ¦ ¦разведение рабочих реагентов. ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦тромбопластинового времени ¦ ¦Задание программы на анализаторе. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Калибровка прибора непосредственно ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦перед проведением исследования. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Установка рабочего барабана, ротора,¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦кювет с рабочими реагентами. Запуск ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выбранной программы. Распечатка ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результатов ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦6.40.2 ¦определение протромбинового ¦исследование ¦Подготовка контрольных материалов и ¦врач- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦времени ¦ ¦разведение рабочих реагентов. ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Задание программы на анализаторе. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Калибровка прибора непосредственно ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦перед проведением исследования. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Установка рабочего барабана, ротора,¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦кювет с рабочими реагентами. Запуск ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выбранной программы. Распечатка ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результатов ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦6.40.3 ¦определение тромбинового ¦исследование ¦Подготовка контрольных материалов и ¦врач- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦времени ¦ ¦разведение рабочих реагентов. ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Задание программы на анализаторе. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Калибровка прибора непосредственно ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦перед проведением исследования. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Установка рабочего барабана, ротора,¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦кювет с рабочими реагентами. Запуск ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выбранной программы. Распечатка ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результатов ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦6.41 ¦проба жгута ¦исследование ¦Обозначение на ладонной поверхности ¦фельдшер- ¦ 2,5 ¦ 2,5 ¦
¦ ¦ ¦ ¦круга диаметром 5 см. Накладывание ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦манжеты от аппарата для измерения АД¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦на плечо, соединение ее с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦манометром. Удержание в течение 5 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мин, ожидая восстановления ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦кровообращения в конечности. Подсчет¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦числа петехий в очерченном круге ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7 ¦Иммунологические ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦исследования ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.1 ¦определение групп крови по ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦системе АВ 0 с ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦использованием стандартных ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦сывороток или перекрестным ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦способом ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.1.1 ¦в капиллярной крови ¦исследование ¦Подготовка реагентов и образцов. ¦врач- ¦ 13 ¦ 8 ¦
¦ ¦ ¦ ¦Маркировка пластины. Раскапывание на¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пластине биоматериала и +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦соответствующих реагентов. ¦фельдшер- ¦ 3 ¦ 3 ¦
¦ ¦ ¦ ¦Инкубирование. Учет результата ¦лаборант ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.1.2 ¦в венозной крови ¦исследование ¦Подготовка реагентов и образцов. ¦врач- ¦ 13 ¦ 8 ¦
¦ ¦ ¦ ¦Маркировка пластины. Раскапывание на¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пластине биоматериала и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦соответствующих реагентов. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Перемешивание. Инкубирование. Учет ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результата ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.2 ¦определение групп крови и ¦исследование ¦Подготовка реагентов и образцов. ¦врач- ¦ 11 ¦ 7 ¦
¦ ¦резус-фактора с ¦ ¦Маркировка пластины. Раскапывание на¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦использованием цоликлонов ¦ ¦пластине биоматериала и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦соответствующих реагентов. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Перемешивание. Инкубирование. Учет ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результата ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.3 ¦определение резус-фактора ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦методом конглютинации с ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦применением желатина или ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦экспресс-методом ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.3.1 ¦в капиллярной крови ¦исследование ¦Подготовка реагентов и образцов. ¦врач- ¦ 12 ¦ 7 ¦
¦ ¦ ¦ ¦Маркировка пробирки. Постановка ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦реакции на определение резус- +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦фактора. Инкубирование. Добавление ¦фельдшер- ¦ 3 ¦ 3 ¦
¦ ¦ ¦ ¦реагента. Перемешивание. Учет ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результата (микроскопирование при ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦использовании желатиновой методики) ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.3.2 ¦в венозной крови ¦исследование ¦Подготовка реагентов и образцов. ¦врач- ¦ 12 ¦ 7 ¦
¦ ¦ ¦ ¦Маркировка пробирки. Внесение в ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирку биоматериала и реагентов. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Перемешивание. Инкубирование. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Добавление реагента. Перемешивание. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Учет результата (микроскопирование ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦при использовании желатиновой ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦методики) ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.4 ¦определение неполных резус- ¦исследование ¦Подготовка реагентов и образцов. ¦врач- ¦ 35 ¦ 10 ¦
¦ ¦антител методом ¦ ¦Маркировка пробирки. ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦конглютинации с применением ¦ ¦Центрифугирование пробирки с кровью.¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦желатина ¦ ¦Внесение в пробирку реагентов и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦сыворотки. Перемешивание. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Инкубирование. Добавление реагента. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Перемешивание. Учет результата (с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦обязательным микроскопированием) ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.5 ¦определение титра неполных ¦исследование ¦Подготовка реагентов и образцов. ¦врач- ¦ 40 ¦ 17 ¦
¦ ¦резус-антител методом ¦ ¦Маркировка пробирки. ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦конглютинации с применением ¦ ¦Центрифугирование пробирки. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦желатина ¦ ¦Разведение сыворотки. Добавление ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦реагентов. Перемешивание. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Инкубирование. Добавление реагента. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Перемешивание. Учет результата (с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦обязательным микроскопированием) ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.6 ¦прямая проба Кумбса ¦исследование ¦Маркировка пробирок. Подготовка ¦врач- ¦ 40 ¦ 7 ¦
¦ ¦ ¦ ¦реагентов и образцов: ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦центрифугирование исходного ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материала, отмывание исследуемых ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦эритроцитов. Постановка реакции на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦плоскости. Инкубирование. Учет ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результата (с обязательным ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопированием) ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.7 ¦непрямая проба Кумбса ¦исследование ¦Маркировка пробирок. Подготовка ¦врач- ¦ 70 ¦ 11 ¦
¦ ¦ ¦ ¦реагентов и образцов: ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦центрифугирование исходного ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материала, отмывание стандартных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦эритроцитов. Внесение в пробирку ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦исследуемой сыворотки и стандартных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦эритроцитов. Перемешивание. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Инкубирование в термостате. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Отмывание эритроцитов. Постановка ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦реакции на плоскости. Инкубирование.¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Учет результата (визуальный и с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦обязательным микроскопированием) ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.8 ¦определение функциональной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦активности Т- и В-лимфоцитов¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.8.1 ¦методом Е-розеткообразования¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.8.1.1 ¦постановка исследования ¦исследование ¦Приготовление смеси фиколл- ¦врач- ¦ 11 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦верографин. Пробу крови оставляют ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦для отстаивания на 0,5 - 1 час. +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦Отбор и наслаивание плазмы с ¦фельдшер- ¦ 16 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦небольшим количеством интерфазного ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦слоя над клеточным осадком на смесь ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦фиколл-верографин. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Центрифугирование. Снятие ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦интерфазного слоя, перенос в чистую ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирку. Добавление ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦физиологического раствора, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦перемешивание, Центрифугирование. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Добавление физиологического ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦раствора, перемешивание, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Центрифугирование. Снятие ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦надосадочной жидкости. Встряхивание ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦осадка. Подсчет количества ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лимфоцитов в отмытой взвеси клеток в¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦камере Горяева. Приготовление ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ 6 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦2 · 10 /л суспензии лимфоцитов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(расчет необходимого количества ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦физиологического раствора и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавление его к имеющемуся объему ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦взвеси лимфоцитов). Приготовление ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦взвеси эритроцитов барана: ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦эритроциты трижды отмывают, после ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦каждого центрифугирования сливают ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦надосадочную жидкость, из осадка ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦готовят 0,5% взвесь. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Т-лимфоциты общ, Т-хелперы: внесение¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦в лунку планшета взвеси эритроцитов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦барана и суспензии лимфоцитов. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Инкубация в термостате. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Центрифугирование. Инкубация. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Добавление глутарового альдегида для¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦фиксации. Удаление глутарового ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦альдегида. Приготовление препарата ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦из осадка в лунке планшета на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предметном стекле. Высушивание, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦фиксация и окраска препарата. Учет ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результата под иммерсионной системой¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопа ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Т-лимфоциты "активные": внесение в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лунку планшета взвеси эритроцитов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦барана и суспензии лимфоцитов. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Инкубация в термостате. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Центрифугирование. Учет результата в¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦камере Горяева ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦В-лимфоциты: приготовление взвеси ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦эритроцитов мыши (кровь получают ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦путем декапитации мыши, помещают в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирку с гепарином, трижды ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отмывают, после каждого ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦центрифугирования супернатант ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦сливают, из осадка готовят взвесь ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦эритроцитов). Внесение в лунку ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦планшета взвеси эритроцитов мыши и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦суспензии лимфоцитов. Инкубация. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Центрифугирование. Инкубация. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Фиксация глутаровым альдегидом. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Удаление глутарового альдегида. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Приготовление препарата из осадка в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лунке планшета на предметном стекле.¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Высушивание, фиксация, окраска ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦препарата. Учет результата под ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦иммерсионной системой микроскопа ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.8.1.2 ¦приготовление гемосистемы (1¦исследование ¦Отмывание эритроцитов барана ¦врач- ¦ ¦ ¦
¦ ¦раз в неделю) ¦ ¦(трижды). Приготовление 3% взвеси ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отмытых эритроцитов. Разведение +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦гемолитической сыворотки. ¦фельдшер- ¦ 180 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦Приготовление смеси взвеси ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦эритроцитов и разведенной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦гемолитической сыворотки. Инкубация ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦смеси ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.8.2 ¦в реакции бласттрансформации¦исследование ¦Стерильно взятую периферическую ¦врач- ¦ - ¦ 20 ¦
¦ ¦лимфоцитов на митогены и ¦ ¦гепаринизированную кровь выдерживают¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦специфические антигены (с ¦ ¦30 - 40 мин при комнатной +------------+---------+-----------+
¦ ¦морфологическим учетом ¦ ¦температуре до четкого разделения ¦фельдшер- ¦ ¦ ¦
¦ ¦результатов) ¦ ¦эритроцитов и плазмы; в стерильные ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пенициллиновые флаконы или пробирки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦с плоским дном наливают по 4 мл ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦среды, содержащей 200 ЕД пенициллина¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦и 100 ЕД стрептомицина в 1 мл; 0,3 -¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦0,5 мл плазмы, содержащей клетки, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавляют во флаконы со средой 199; ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦флаконы с пробами закрывают пробками¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦и в вертикальном положении помещают ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦на 48 - 72 ч в термостат при ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦температуре 37 град. C; после ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инкубирования отсасывают 3 мл ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦надосадочной жидкости, а осадок ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ресуспендируют в оставшемся 1 мл ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦среды и переносят в центрифужные ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирки; осадок центрифугируют 10 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мин при 1000 об/мин, после чего ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦надосадочную жидкость удаляют; в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирки добавляют 5 мл 20%-ной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦уксусной кислоты, выдерживают 5 мин,¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦центрифугируют 10 мин, надосадочную ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦жидкость удаляют, а осадок переносят¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦на обезжиренное предметное стекло и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦после высыхания окрашивают по ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Романовскому. Результат реакции ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦учитывают под микроскопом на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦основании морфологической структуры ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦клеток ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.8.3 ¦в реакции торможения ¦исследование ¦В капилляры до метки набирают с ¦врач- ¦ - ¦ 20 ¦
¦ ¦миграции лейкоцитов на ¦ ¦часового стекла или из пробирки ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦митогены (для Т-лимфоцитов) ¦ ¦смесь, состоящую из +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦гепаринизированной крови (0,2 мл) и ¦фельдшер- ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦соответствующего антигена или ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦митогена, растворенного в 0,5 мл ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦изотонического раствора; капилляры ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦запаивают с одного конца парафином ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦или сургучом и затем центрифугируют ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦5 мин; капилляры в вертикальном ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦положении помещают на 18 - 24 ч в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦термостат при температуре 37 град. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦C; после инкубации учитывают ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результат реакции под микроскопом ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.8.4 ¦с использованием ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦моноклональных антител ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.8.4.1 ¦иммуноморфологическим ¦исследование ¦Приготовление смеси фиколл- ¦врач- ¦ - ¦ 35 ¦
¦ ¦исследованием ¦ ¦верографин. Пробу крови оставляют ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦для отстаивания на 0,5 - 1 час. +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦Отбор и наслаивание плазмы с ¦фельдшер- ¦ - ¦ 120 ¦
¦ ¦ ¦ ¦небольшим количеством интерфазного ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦слоя над клеточным осадком на смесь ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦фиколл-верографин. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Центрифугирование. Снятие ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦интерфазного слоя, перенос в чистую ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирку. Добавление ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦физиологического раствора, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦перемешивание, Центрифугирование. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Снятие надосадочной жидкости. Снова ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавление физиологического ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦раствора, перемешивание, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Центрифугирование. Отмывка ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лимфовзвеси проводится 2 раза. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Снятие надосадочной жидкости. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Встряхивание осадка, подсчет ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦количества лимфоцитов в отмытой ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦взвеси клеток в камере Горяева под ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопом Расчет необходимого ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦количества физиологического раствора¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦для разведения лимфовзвеси. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ 6 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Приготовление 2 · 10 /л суспензии ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лимфоцитов путем добавления ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦физраствора к имеющемуся объему ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦взвеси лимфоцитов. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Внесение в лунки планшета ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦необходимых CD-диагностикумов и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦суспензий лимфоцитов. Инкубация в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦термостате. Центрифугирование. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Инкубация в холодильнике. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Приготовление рабочей концентрации ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦глутарового альдегида и добавление ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦его для фиксации в каждую ячейку ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦планшета. Удаление глутарового ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦альдегида. Приготовление препарата ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦из осадка лунок планшет на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предметном стекле. Высушивание, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦фиксация, окраска препарата. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Микроскопия препарата под ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦иммерсионной системой. Дезинфекция ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦проб, посуды и рабочего места ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.8.4.2 ¦методом проточной цитометрии¦исследование ¦Маркировка пробирок. Раскапывание ¦врач- ¦ - ¦ 40 ¦
¦ ¦ ¦ ¦нативного биоматериала и реагентов. ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Инкубация. Лизирование эритроцитов и¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отмывание клеток с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦центрифугированием Выделение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мононуклеаров в градиенте плотности.¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Лизирование оставшихся эритроцитов. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Мечение моноклональными антителами. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Инкубирование. Стабилизация ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦раствором. Настройка проточного ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦цитометра. Исследование реакционной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦смеси. Анализ полученных результатов¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Дезинфекция ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.9 ¦определение концентрации ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦основных классов и ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦подклассов иммуноглобулинов ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.9.1 ¦методом радиальной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦иммунодиффузии ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.9.1.1 ¦с приготовлением и заливкой ¦исследование ¦Подготовка буфера: 1,5 г агара ¦врач- ¦ - ¦ 6 ¦
¦ ¦агара, построением ¦ ¦растворяют в 100 мл буфера на ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦калибровочной кривой ¦ ¦водяной бане, охлаждают до 48 град. +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦C и смешивают с АС, подогретой до ¦фельдшер- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦той же температуры, в соответствии с¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инструкцией. Наносят пипеткой 2 мл ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦смеси на предметное стекло, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦установленные строго горизонтально ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦на подставке, нагретой до 35 - 40 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦град. C. Золь агара, содержащий АТ, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦распределяется по поверхности ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предметного стекла и застывает слоем¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦толщиной 1 мм. На предметном стекле ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦в слое геля вырезают по 8 лунок (и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦более) при помощи отшлифованной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стеклянной трубки, соединенной с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦водоструйным насосом. Отбирают ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦нужный объем и готовят разведения ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стандартов в отдельном планшете. В ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦каждую из лунок вносят по 2 мкл ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦раствора антигена (стандартов и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦образцов). Реакцию простой ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦радиальной ИД проводят во влажной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦камере 24 - 48 часов. Препараты ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦высушивают и окрашивают. К моменту ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦завершения диффузии наблюдается ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦прямая линейная зависимость между ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦исходной концентрацией АГ и площадью¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦преципитата. Проводят измерение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦колец преципитации стандартов и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦исследуемых образцов с помощью ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопа Построение калибровочной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦кривой и проведение расчетов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦концентраций проб. Дезинфекция проб ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦и рабочего места ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.9.1.2 ¦с использованием готовых ¦исследование ¦В готовые планшеты с лунками ¦врач- ¦ - ¦ 6 ¦
¦ ¦иммунодиффузионных планшет ¦ ¦добавляют предварительно разведенные¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦образцы. Планшеты помещают во +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦влажную камеру. Инкубируют, ¦фельдшер- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦высушивают и окрашивают. Для ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦построения графика берут логарифм ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦концентрации АГ и как функцию от ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦него площадь преципитата, квадрат ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦диаметра зоны преципитации или ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦логарифм диаметра преципитата. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Проводят оценку преципитата ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.9.2 ¦методом иммуноэлектрофореза ¦исследование ¦Приготовление реагентов: краситель -¦врач- ¦ - ¦ 8 ¦
¦ ¦на геле агара или агарозы ¦ ¦содержимое флакона разбавляем ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦дистиллированной водой, +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦обесцвечиватель - содержимое флакона¦фельдшер- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦разбавляем дистиллированной водой, ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦фиксаж - смешиваем этанол, уксусную ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦кислоту, дистиллированную воду; ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦разбавляем сыворотку рабочим ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦раствором, наносим пробы на гель, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦удаляем избыток сыворотки, помещаем ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пластинку с агарозой в камеру, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦проводим электрофорез 20 мин, затем ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦фиксируем 15 мин, сушим, погружаем ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пластинку в краситель, следующим ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦этапом в обесцвечиватель, сушим, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦сканируем, распечатываем результаты ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.9.3 ¦турбидиметрическим методом ¦исследование ¦В пробирке смешивают сыворотку и ¦врач- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦реактив 1, тщательно перемешивают ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стеклянной палочкой. Инкубируют 10 +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦мин при комнатной температуре. ¦фельдшер- ¦ - ¦ 2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦Центрифугируют 15 мин. Отбирают ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦центрифугат, и к нему добавляют ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦реактив 2. Инкубируют 15 мин. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Измеряют оптическую плотность на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦фотоэлектроколориметре. Результаты ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦сравнивают с результатом контрольной¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробы. Разница их значений отражает ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦концентрацию определяемого вещества ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.9.4 ¦методом иммуноферментного ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦анализа ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦7.9.4.1 ¦полуавтоматизированный ¦исследование ¦Отбор образцов и стандартов и ¦врач- ¦ - ¦ 3 ¦
¦ ¦расчет ¦ ¦внесение их в пробирки или лунки ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦планшета, на которых предварительно +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦проводят процедуру фиксации, ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦
¦ ¦ ¦ ¦отмывки, закрепления АТ (антитело) ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦или АГ (антиген). (На готовых тест- ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦системах АГ или АТ заранее ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦фиксированы в лунках). Инкубация 30 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦- 60 мин (и более) в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦термостатируемом плашечном шейкере. ¦ ¦ ¦ ¦
Страницы: | Стр.1 | Стр.2 | Стр.3 | Стр.4 | Стр.5 | Стр.6 | Стр.7 | Стр.8 | Стр.9 | Стр.10 | Стр.11 | Стр.12 | Стр.13 | Стр.14 | Стр.15 | Стр.16 | Стр.17 | Стр.18 | Стр.19 | Стр.20 | Стр.21 | Стр.22 | Стр.23 | Стр.24 | Стр.25 | Стр.26 | Стр.27 | Стр.28 | Стр.29 | Стр.30 | Стр.31 | Стр.32 | Стр.33 | Стр.34 | Стр.35 | Стр.36 | Стр.37 | Стр.38 | Стр.39 | Стр.40 | Стр.41 | Стр.42 | Стр.43 | Стр.44 | Стр.45 | Стр.46 | Стр.47 | Стр.48 | Стр.49 | Стр.50 | Стр.51 |
| 
